Thèse soutenue

Anticorps catalytiques. Carboxylation du ribulose-1,5-bisphosphate

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Auteur / Autrice : NELLY GOURLAOUEN
Direction : Andrée Marquet
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
Date : Soutenance en 1995
Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

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Depuis 1986 une nouvelle classe de molecules est apparue qui allie la diversite des anticorps au pouvoir catalytique des enzymes: les anticorps catalytiques. Ils sont obtenus en produisant des anticorps contre un analogue stable de l'etat de transition d'une reaction donnee. Le but du sujet est d'obtenir des anticorps capables d'effectuer la carboxylation du ribulose, reaction catalysee chez les plantes par la ribulose-1,5-bisphosphate carboxylase oxygenase (rubisco), enzyme du cycle de calvin. Lors de ce travail nous avons synthetise un derive du carboxyarabinitol-1,5-bisphosphate, puissant inhibiteur de l'enzyme, qui sera utilise comme haptene pour les immunisations. L'etude de la structure et de la stabilite de cette molecule a ete effectuee en solution par rmn #1#3c. L'haptene a ete couplee a une proteine porteuse: la thyroglobuline. Le conjugue ainsi obtenu est utilise pour l'immunisation qui est en cours. Une autre partie du travail a ete de mettre au point un protocole qui sera utilise pour la selection des anticorps affins pour l'haptene, ainsi qu'une methode pour effectuer les tests catalytiques. Notre but n'est pas, bien sur, d'obtenir des anticorps capables de concurrencer l'enzyme mais simplement de montrer qu'un anticorps est capable de catalyser la formation d'une liaison carbone-carbone intermoleculaire. Jusqu'a present, les abzymes formant des liaisons carbone-carbone catalysent des reactions de diels-alder ou des rearrangements intramoleculaires