Les recepteurs de l'angiotensine ii : approche immunologique et pharmacologique, et role dans le developpement du rein de rat

Angiotensin ii receptors: immunologic and pharmacologic approach, and role in rat kidney development

• Auteur / Autrice : MICKAELLE BENSOUSSAN
• Direction : Pierre Ronco
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1995
• Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

L'angiotensine ii (aii), le principal mediateur du systeme renine-angiotensine, joue un role essentiel dans la regulation de la pression arterielle. Il existe deux sous-types majeurs de recepteurs de l'aii (at1 et at2) identifies par des antagonistes specifiques. La these se compose de deux parties. Dans la premiere partie, nous avons analyse les interactions entre l'aii et ses recepteurs a l'aide d'anticorps monoclonaux anti-aii. Cette approche immunologique montre que: (i) le peptide antisens hiia (code par l'arn complementaire de l'arnm de l'aii humaine) est capable d'inhiber la fixation de l'aii sur ses recepteurs membranaires sans se fixer aux recepteurs. En revanche, des arguments indirects font penser que l'hiia se fixe sur un epitope de l'aii implique dans la liaison de l'aii au recepteur. Ces resultats suggerent que l'hiia presente une conformation tridimensionnelle en solution similaire a celle du recepteur membranaire. (ii) aucun des antagonistes synthetiques de l'aii n'est capable d'inhiber la fixation de l'aii sur les differents anticorps monoclonaux et polyclonaux anti-aii reconnaissant la partie centrale (qui se lie au recepteur) ou la partie c-terminale (transductrice du signal) de l'aii. Ces resultats suggerent que l'aii et les antagonistes testes n'ont aucun epitope en commun et nous ont conduits a formuler, pour la premiere fois, l'hypothese de sites de liaison distincts de l'aii et des antagonistes at1 et at2 sur les recepteurs membranaires. Dans la deuxieme partie de la these, nous avons utilise la culture organotypique de rein de fetus de rat afin de determiner le role de l'aii dans le developpement. Dans ce modele de differenciation in vitro, l'explant metanephrique reproduit les principales etapes de l'ontogenie renale, et il existe une augmentation acceleree de l'expression des at1, associee a une diminution rapide des at2. Nous avons utilise ce modele, pour analyser l'effet des antagonistes de l'aii sur le developpement renal. Les resultats montrent une inhibition du nombre de cellules dans les reins cultives en presence de l'antagoniste at1 ou de l'antagoniste at2. Ces resultats suggerent un role de l'aii dans la proliferation cellulaire des reins en developpement via les recepteurs at1 et at2. En conclusion, cette these illustre l'interet de l'approche immunologique pour apprehender les interactions entre des recepteurs membranaires et differentes molecules antagonistes (premiere partie) et montre que la culture organotypique de rein fetal est un modele adapte pour l'etude des processus biochimiques ou hormonaux impliques dans l'ontogenie renale (deuxieme partie). Elle suggere que l'aii est une hormone potentiellement impliquee dans le developpement renal