Etude des facteurs nutritifs intervenant lors de l'initiation de l'embryogenese somatique du cocotier (cocos nucifera l. ) en milieu gelose et mise au point des suspensions embryogenes

Study of nutritional factors involved in somatic embryogenesis initiation of coconut (cocos nucifera l. ) on solid medium and establishment of embryogenic suspensions

• Auteur / Autrice : CHRISTINE MAGNAVAL
• Direction : Emile Miginiac
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1995
• Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

Chez le cocotier, la micropropagation par embryogenese somatique in vitro est la seule voie pour le clonage d'individus d'elite qui ameliorerait la productivite et l'homogeneite des plantations. Cependant, cette plante est recalcitrante a la regeneration. Afin de mieux maitriser les conditions d'initiation de l'embryogenese, une etude descriptive des facteurs nutritifs a ete realisee. Des dosages dans les milieux ont permis de montrer des besoins specifiques en glucose, nitrate et phosphate, relies a une diminution de la teneur en saccharose des cals et a une activation de la proteosynthese. Une analyse des acides amines endogenes a permis de caracteriser deux types de comportement: des cals bien orientes vers l'embryogenese caracterises par une augmentation des teneurs en proline, valine, leucine et alanine ; des cals qui retournent a l'etat meristematique, caracterises par une diminution globale de la teneur en acides amines. L'hypothese selon laquelle les acides amines constitueraient des marqueurs physiologiques de l'orientation vers l'embryogenese est discutee. Un nouveau stimulus inducteur de l'embryogenese a ete caracterise. Il consiste a quadrupler la concentration du saccharose des milieux. La recherche de marqueurs proteiques precoces, specifiques de l'embryogenese, a ete realisee par des essais consistant a verifier la presence d'un marqueur de 50 kda egalement present chez plusieurs especes. L'etablissement de suspensions embryogenes representerait une alternative a l'absence de phase de multiplication constituant actuellement un facteur limitant pour le clonage a grande echelle du cocotier. Des suspensions ont ete obtenues pour la premiere fois chez le cocotier a partir de cals friables en milieu agite. Les modalites de proliferation des suspensions sont decrits. Les premiers essais d'expression des potentialites embryogenes des suspensions ont permis la formation de nodules meristematiques epidermises, par diminution de la concentration en 2,4-d et apport de bap