Cartographie immunopeptidique du recepteur porcin de la lutropine et de ses interactions avec l'hormone

Immunopeptidic mapping of the porcine lutropin receptor and hormone-receptor interactions

• Auteur / Autrice : Laurence Couture
• Direction : Roland Salesse
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1995
• Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

Le recepteur de l'hormone luteinisante (lh) est une glycoproteine appartenant a la famille des recepteurs a sept segments transmembranaires couples aux proteines g. Il est constitue d'un long domaine extracellulaire n-glycosyle de 340 acides amines (ectodomaine) responsable de la liaison a haute affinite de l'hormone et s'apparentant a la famille des proteines contenant des motifs repetes riches en leucine (lrr). Le domaine transmembranaire est forme des sept segments traversant la membrane, predits en helice , relies entre eux par trois boucles extracellulaires et trois boucles cytoplasmiques. L'extremite c-terminale cytoplasmique est engagee dans la liaison avec les proteines g. L'interaction de l'hormone avec le recepteur s'effectue grace a des regions multiples et discontinues et entraine l'activation du recepteur provoquant une synthese d'amp cyclique. Ce travail a consiste, au moyen de peptides et d'anticorps, a determiner quelles etaient les sequences du recepteur impliquees dans la liaison et/ou la transduction du signal hormonal. Nous avons produit le recepteur recombinant sous plusieurs formes (ectodomaine en cellules d'insecte, recepteur entier et complexe ectodomaine-hormone en cellules cho). Des peptides derives du recepteur nous ont permis de preciser que les sequences 21-24 et 102-107 etaient impliquees dans l'interaction avec l'hormone. De plus, grace a un anticorps monoclonal nous avons mis en evidence une interaction entre la sequence 15-17 de la sous-unite de l'hormone et la deuxieme boucle extracellulaire. D'autre part, la resolution de la structure tridimensionnelle de l'inhibiteur de la ribonuclease, premiere proteine a lrr a avoir ete cristallisee, nous a incites a modeliser l'ectodomaine du recepteur suivant cette structure. Le modele ainsi obtenu semble coincider avec les resultats experimentaux. Enfin, nous avons immunise des souris males avec les regions du recepteur impliquees dans la liaison de l'hormone et observe que la vaccination provoquait une baisse de leur fertilite