Mecanismes impliques dans la regulation de la concentration des hormones thyroidiennes dans les astrocytes de rat en culture : transport membranaire et liaison cytosolique

Mechanisms involved in the regulation of thyroid hormone concentration in cultured rat astrocytes: membrane transport and cytosolic binding

• Auteur / Autrice : ALINE BESLIN
• Direction : Jacques Françon
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1995
• Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

Le systeme de transport des hormones thyroidiennes (ht), t#3 et t#4, et les proteines de liaison cytosoliques ont un role important dans l'accumulation cellulaire de ces hormones et dans la regulation de l'acces a leurs cibles intracellulaires. Les astrocytes de rat en culture, cellules-cibles des ht, ont ete choisis comme modele d'etude de ces processus. Nous avons montre l'existence d'une relation etroite entre le systeme de transport des ht et le systeme l qui transporte les acides amines neutres et aromatiques. La leucine et le tryptophane sont transportes dans les astrocytes par un composant de haute affinite de ce systeme, le systeme l1. La t#3 inhibe celui-ci avec une affinite elevee et de facon competitive. Cependant, le systeme l1 n'est pas implique dans un processus concentratif des ht, dans les astrocytes. La diminution du ph intracellulaire des cellules inhibe le transport des ht, lorsque l'echangeur na#+/h#+ est bloque, en absence de sodium extracellulaire ou en presence d'amiloride. Apres acidification intracellulaire, l'activation de l'echangeur par le sodium restaure l'activite de transport de la t#3. Ces resultats suggerent l'existence d'une relation fonctionnelle entre l'echangeur na#+/h#+ et le systeme de transport des ht, pouvant rendre compte d'un transport actif de ces hormones, dans les astrocytes. Des sites de liaison cytosoliques des ht saturables et de haute affinite ont ete caracterises. Le marquage covalent par photoaffinite, avec la t#3 ou la t#4 radioactives, a permis d'identifier un polypeptide de 35 kda. Le nadph active la liaison de la t#3 a ses sites, tandis que l'oxydation du nucleotide favorise sa dissociation. Le polypeptide de 35 kda pourrait etre implique dans l'accumulation et le transport intracellulaires des ht, et dans la regulation de leur concentration au niveau de leurs cibles