Analyse des antithyroidiens de synthese en gas chromatography/mass spectrometry et en liquid chromatography/mass spectrometry : application au controle des animaux de boucherie

Thyreostats analysis by gas chromatography/mass spectrometry and liquid chromatography/mass spectrometry: application of the control of livestock

• Auteur / Autrice : NATHALIE LE MARREC
• Direction : François André
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1995
• Etablissement(s) : Nantes

Résumé

Les antithyroidiens de synthese sont des substances qui ont pour structure de base commune le groupe thiocarbamide. Ils sont capables d'inhiber la production des hormones thyroidiennes de facon competitive. L'administration de doses repetees a des bovins a pour consequence l'apparition d'une hypothyroidie ce qui a pour effets secondaires une diminution du metabolisme basal, une retention d'eau dans les tissus conjonctifs ainsi qu'un ralentissement du tractus gastro-intestinal. Les animaux traites semblent plus lourds. L'utilisation de ces molecules, en elevage bovin, a des fins d'engraissement, a donc amene les pouvoirs publics a prendre des mesures pour enrayer cette pratique frauduleuse. Nous avons donc recherche une methode d'identification des residus thyreostatiques dans l'urine et la glande thyroide des animaux de boucherie. Notre travail a consiste d'une part, a explorer les capacites de la technique gc/ms et d'autre part, a appliquer une technique lc/ms. De l'etude bibliographique, il ressort que des difficultes d'extraction-purification entrainent une diminution de la sensibilite et que le spectrometre de masse est tres certainement le detecteur de choix dans le cas d'analyse de traces de residus dans des matrices biologiques. Nous avons donc tente d'ameliorer l'etape d'extraction-purification au moyen de colonne spe (solid phase extraction). Il semble que les colonnes seppakpluspolaire et dowex-mercuree, deja proposees dans des protocoles d'analyse, soient les mieux adaptees a l'analyse des ats. Cependant, nous n'avons pas ameliore l'extraction-purification par rapport aux methodes existantes. Parmi les diverses techniques de derivation que nous avons etudiees, il resulte que la silylation au moyen du mtbstfa est particulierement adaptee a l'identification des ats en gc/ms en mode ei dans le cadre d'analyse effectuees en routine. Toutefois, l'alkylation par le bromo pentafluorobenzyl, moins aisee a mettre en uvre, est une technique envisageable dans le cas de confirmation d'echantillons suspectes positifs. L'etude que nous avons realisee en frit-fab lc/ms sim-hr est une nouvelle application de cette technique. Nous avons montre que l'analyse de residus de faible poids moleculaire est egalement realisable en lc/ms qui est classiquement appliquee a l'analyse des macromolecules. D'autre part, cette methode permet la recherche du thiouracile et du methylthiouracile dans la glande thyroide a de tres faibles concentrations (dix ppb). Cette methode specifique est d'une sensibilite superieure aux methodes colorimetriques et chromatographiques (cpg, hplc) ainsi qu'a celles associant la cpg et la spectrometrie de masse