Clonage, séquençage et surexpression d'isoenzymes de la créatine kinase de muscle cardiaque : analyse du rôle des tryptophanes

Cloning, sequencing and overexpression of cardiac muscle creatine kinase isoenzymes, analysis of the role of tryptophan residues

• Auteur / Autrice : Catherine Perraut
• Direction : Christian Vial
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences. Biochimiste
• Date : Soutenance en 1995
• Etablissement(s) : Lyon 1
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Christian Vial

Mots clés

Mots clés contrôlés

Mutagénèse dirigée

Protéines recombinées

Tryptophane

ADN complémentaire

Isoenzymes

Créatine kinase

Résumé

La creatine kinase catalyse la reaction de phosphorylation de l'adp par la phosphocreatine. Il existe 5 isoenzymes differents de la creatine kinase: 3 cytosoliques (mm, bb et mb) et 2 mitochondriaux (ubiquitaire et sarcomerique). Nous avons clone et sequence les adnc codant pour les isoenzymes cytosolique et mitochondrial de cur de lapin. Un systeme d'expression et de purification de la ck mm recombinante a ete ensuite mis au point. Les 4 tryptophanes de la mm ont ete mutes et les proteines recombinantes correspondantes purifiees afin d'etudier le role de chacun de ces residus dans la structure et l'activite catalytique de la ck mm