Etude des conséquences de l'utilisation des solvants organiques dans la cryoconservation de l'embryon caprin
Auteur / Autrice : | Francis Fieni |
Direction : | Daniel Tainturier |
Type : | Thèse de doctorat |
Discipline(s) : | Productions animales et qualité des denrées |
Date : | Soutenance en 1995 |
Etablissement(s) : | Toulouse, INPT |
Mots clés
Résumé
L'utilisation de solvant organique est indispensable pour congeler avec succes les embryons, mais le choix du type de solvant, ainsi que de sa concentration, depend de l'espece concernee. Chez les caprins, en absence de phase de changement d'etat et suite a une incubation de une heure a la temperature du laboratoire, le propylene glycol et le glycerol apparaissent comme des molecules embryotoxiques a une concentration de 3 mol/l. Inversement, le sucrose, l'ethylene glycol et le dimethylsulfoxyde semblent etre des cryoprotecteurs relativement peu toxiques pour l'embryon caprin. La mise en uvre de la congelation (induction de la cristallisation a c, pente de 0,3c x mn#-#1, immersion dans l'azote liquide a 0 c) montre que parmi les protocoles compares, les meilleurs resultats sont obtenus lorsque l'embryon congele est protege par l'ethylene glycol (1,5 m) dont l'extraction est assuree par l'association sucrose (0,25 m), cryoprotecteur a concentration decroissante (1 m - 0,5 m). Dans ces conditions, le taux d'embryons presentant en culture un developpement apres decongelation s'eleve a 60 p. Cent pour les blastocystes et a 24 p. Cent pour les morulae. L'etude des proportions respectives des effets letaux subis par l'embryon caprin, consecutifs a la toxicite des cryoprotecteurs ou a la limite de leur potentialite cryoprotectrice confirme que l'ethylene glycol et le dimethylsulfoxyde sont peu toxiques. Par contre, au cours de la phase de congelation leurs proprietes cryoprotectrices semblent limitees. L'ensemble de ces etudes soulignent l'importance du stade de developpement embryonnaire considere et met en evidence que les blastocystes ne sont pas mieux adaptes a la congelation que les morulae