Thèse soutenue

Conception et réalisation d'un appareil de mesure de la résistance osmotique de la membrane de l'hématie
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Auteur / Autrice : Jacques Didelon
Direction : Jean-François Stoltz
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Génie biologique
Date : Soutenance en 1995
Etablissement(s) : Vandoeuvre-les-Nancy, INPL
Jury : Rapporteurs / Rapporteuses : Gérard Potron

Résumé

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Le comportement de la membrane de l'hématie et en particulier la mesure de sa résistance osmotique présente un intérêt diagnostique pour le clinicien. De nombreuses pathologies hémolytiques influencent considérablement cette résistance (maladies hémolytiques auto-immunes, sphérocytose héréditaire,). Quelques appareils commercialisés permettent d'étudier les propriétés rhéologiques de la membrane, mais aucun ne réalise spécifiquement la mesure de la résistance des membranes jusqu'à leur rupture. Actuellement seule la technique manuelle proposée par DACIE est utilisée en routine par les laboratoires d'analyses médicales. Dans ce travail, il est développé un appareil (fragilimètre) destiné à la mesure de la résistance des membranes à l'hémolyse provoquée. Le principe consiste à faire évoluer progressivement la force ionique, de 0,154 M à environ 0,025 M d'une suspension d'hématies diluées dans une solution tampon. La variation de pression osmotique engendrée au niveau de la cellule provoque l'ouverture de pores par lesquels s'échappe l'hémoglobine. La mesure en temps réel de l'intensité de transmission lumineuse traversant une solution de sang total diluée renseigne sur le phénomène. Les résultats obtenus renseignent directement sur la résistance de la membrane qui est considérée optiquement comme une particule diffusante. La détermination de la transmission initiale, à 50% et totale permet d'apprécier les caractéristiques de l'hémolyse. Les études ont porté principalement sur l'analyse d'échantillons de sang témoins frais à 37°C et incubé 24 h à 37°C. Les résultats des valeurs obtenues sur ces 2 populations permettent au système de les distinguer aisément. L'expérience, entièrement automatisée, est réalisée en moins de 20 min.