Glycoproteines secretees et embryogenese chez le pin identification d'un glycopeptide

Secreted (glyco)proteins in pine embryogenesis : identification of a glycopeptide

• Auteur / Autrice : JEAN-MARC DOMON
• Direction : Hélène David
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1995
• Etablissement(s) : Amiens

Résumé

L'embryogenese somatique de pinus caribaea var. Hondurensis se deroule selon le processus couramment decrit chez les coniferes. Les diverses lignees embryogenes maintenues en presence d'auxine sont constituees d'embryons a un stade tres precoce de developpement (structures bipolaires de type tete embryonnaire/suspenseur). L'objectif de notre travail etait de caracteriser l'etat embryogene chez cette espece ligneuse. Plusieurs lignees embryogenes ont ete comparees a des lignees non embryogenes constituees par des cals proliferants. L'analyse par electrophorese nephge/page puis, apres electrotransfert des proteines, la detection sur empreinte par la concanavaline a ou un immunserum dirige contre des glycannes complexes vegetaux ont ete realisees. Un groupe de trois polypeptides extracellulaires, de masses moleculaires voisines de 27 kda, glycosyles, caracterise l'ensemble des lignees embryogenes. D'autres polypeptides sont plutot specifiques d'une lignee embryogene particuliere, presentant un phenotype qui lui est propre. Ces trois polypeptides (27 kda) denommes gps 111, 103 et 94 sont des marqueurs du stade precoce de developpement des embryons somatiques. Nous avons montre qu'ils peuvent etre utilises comme diagnostic de ce processus de developpement chez le pin et leur utilisation en recherche forestiere finalisee peut s'averer d'un grand interet. Nous avons identifie ces trois glycopeptides comme appartenant a un meme groupe de proteines. La partie n-terminale de gp 111 presente une sequence de 12 acides amines (dpxxlqdfcvad) qui s'aligne sur des germines, proteines associees a la germination des cereales mais aussi a la reponse a des stress biotiques et abiotiques chez d'autres plantes. Par contre, ces proteines n'ont jamais ete signalees dans l'embryogenese somatique. Les homologies de sequences ont ete confortees par des controles immunologiques. Les gps 111, 103 et 94 presentent bien des reactions croisees avec des immunsera contenant des anticorps anti-germines de cereales. La fonction de ces proteines dans la germination des cereales et des pins (nos travaux non publies) decoule vraisemblablement de leur activite enzymatique (oxalate oxydase) permettant la liberation de h#2o#2. Par contre, leur fonction dans l'embryogenese somatique ou zygotique precoce chez les pins reste a demontrer car aucune activite enzymatique n'a ete detectee a ce stade de developpement.