Les 5 -réductases de type 1 et 2 : études moléculaire, pharmacologique et de régulation dans la prostate humaine normale et pathologique

5 Alpha-reductase of type 1 and 2. Molecular, pharmacological and regulatory studies in the human normal and pathological prostate

• Auteur / Autrice : Catherine Hatjinikolaidou-Iehlé
• Direction : Pierre-Marie Martin
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie cellulaire et microbiologie
• Date : Soutenance en 1995
• Etablissement(s) : Aix-Marseille 2
• Partenaire(s) de recherche : Autre partenaire : Université d'Aix-Marseille II. Faculté des sciences (1969-2011)

Résumé

La 5 alpha-reductase (5ar) catalyse la reduction de testosterone en dihydrotestosterone (dht). Deux isoformes de cette enzyme sont connues chez l'homme, mais leurs roles respectifs ne sont pas encore bien etablis. Grace a l'expression des deux isoformes dans le systeme du baculovirus/cellules d'insecte, nous avons pu mettre au point un systeme permettant l'etude du mode d'action et de la selectivite de composes potentiellement inhibiteurs de l'activite 5ar. Nous avons ainsi montre que le 4-ma, le fce 28260 et l'extrait lipidique de serenoa repens (lsesr) inhibent efficacement les deux isotypes, alors que le finasteride et le turosteride sont des inhibiteurs selectifs de la 5ar de type 2. Un autre compose, le ly191704, est lui selectif de la type 1. Nous avons suggere que l'action inhibitrice du lsesr serait due a une modification de l'architecture de la membrane dans laquelle se trouvent les enzymes provoquant ainsi la modulation de leur conformation. L'etude de regulation par les androgenes et l'egf utilisant le modele de la lignee prostatique humaine androgeno-independante du145 a montre que la dht exerce une regulation positive sur la transcription du gene de la 5ar de type 1, augmentant ainsi la quantite de son messager et l'activite de l'enzyme. Cette activation ne se fait pas a l'aide du recepteur aux androgenes. L'egf seul n'a aucun effet sur l'activite de l'enzyme, mais combine a la dht il inhibe la stimulation induite par celle-ci de facon dose-dependante. L'expression recombinante de l'isoforme de type 1 nous a egalement permis de developper un anticorps monoclonal contre cette proteine partiellement purifiee et stabilisee dans les liposomes. En nous appuyant sur des preuves moleculaires, pharmacologiques et immunologiques, nous avons demontre que dans la prostate pathologique humaine la 5ar de type 1 est presente et de facon majoritaire dans l'epithelium, alors que dans les fibroblastes, c'est la type 2 qui predomine. Les resultats d'hybridation in situ ne montrent pas de difference de localisation des deux isoformes entre tissu hyperplasique et tissu cancereux. En revanche, quand on regarde l'expression proteique de la type 1 grace a l'anticorps monoclonal developpe, elle semble preferentiellement localisee dans les cellules epitheliales basales de tissu hyperplasique, alors que dans le tissu normal, sa localisation est principalement stromale