Caracterisation in vitro et in vivo des produits de maturation de la polyproteine codee par le rna2 des virus du court-noue de la vigne (gflv et armv). Role de ces proteines dans le mouvement du gflv de cellule a cellule et dans la replication du rna2
Auteur / Autrice : | Christophe Ritzenthaler |
Direction : | L. PINCK |
Type : | Thèse de doctorat |
Discipline(s) : | Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie |
Date : | Soutenance en 1994 |
Etablissement(s) : | Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008) |
Résumé
Deux nepovirus sont responsables de la maladie du court-noue de la vigne, le grapevine fanleaf virus (gflv) et l'arabis mosaic virus (armv). Leur genome se compose de deux molecules de rna (rna1 et rna2). Le rna1 du gflv-f13 (7342 nt) code pour une polyproteine de mr 253k divisee en 5 domaines fonctionnels presentant les motifs caracteristiques de cofacteur de proteinase, helicase, vpg, proteinase a cysteine et rna polymerase rna dependant. Le rna2 du gflv (3774 nt) code pour une polyproteine (p2) de mr 122k clivee aux sites cys#2#5#7/ala#2#5#8 et arg#6#0#5/gly#6#0#6 en trois produits finaux de maturation denommes p28, p38 et cp (proteine de capside). L'armv-s presente la particularite de posseder deux rna2 de taille differente (rna2-u: 3852 nt et rna2-l: 3711 nt) codant chacun pour une polyproteine unique de mr 124k et 119k, respectivement. Ces deux polyproteines s'organisent de la meme maniere que la proteine p2 du gflv et sont quasiment identiques entre elles a l'exception de leur domaine n-terminal. La proteine p38 du gflv a ete exprimee dans e. Coli et purifiee ce qui a permis l'obtention et la purification par immuno-affinite des anticorps anti-p38. La proteine p38 est un produit final de maturation in vivo, elle s'accumule de maniere permanente dans les cellules infectees. Sa localisation en surface de tubules contenant des particules virales et son role indispensable dans le mouvement de cellule a cellule du virus en font la proteine de mouvement du gflv. Le domaine codant pour la proteine p28 est quand a lui necessaire a la replication du rna2