Etude structurale et fonctionnelle d'une proteine specifique de pollen a domaines lim et de son gene chez le tournesol (helianthus annuus l. )

Structural and functional studies of a sunflower pollen specific lim protein and its gene

• Auteur / Autrice : RACHEL BALTZ
• Direction : André Steinmetz
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1994
• Etablissement(s) : Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008)

Résumé

Un adnc de 912 nucleotides, specifique du pollen de tournesol, code pour une proteine nommee plim-1 contenant deux domaines lim (regions riches en cysteine et histidine pouvant s'organiser sous forme de doubles doigts de zinc). Cette proteine possede, en plus, deux domaines basiques, un motif de 5 acides amines (a/t/s, d/e, tqn) repete six fois a l'extremite c-terminale et plusieurs sites potentiels de phosphorylation. Un clone d'adnc specifique d'ovaire codant pour une proteine olim-1 montre les memes caracteristiques, excepte le fait que le motif pentapeptidique c-terminal n'est pas present. Le gene sf3, codant pour plim-1, comporte 4 introns courts et est present au moins en dix copies dans le genome de tournesol. Les 224 nucleotides en amont du debut de transcription sont capables de diriger l'expression d'un gene reporter dans le pollen de tabac et constituent un promoteur fort specifique de pollen. Divers mutants de la proteine ont ete exprimes dans e. Coli et ont montre qu'elle est capable d'interagir avec l'adn. Des anticorps anti-plim-1 polyclonaux ont ete produits et utilises pour mettre en evidence la proteine dans des extraits proteiques de pollen et de fleurs. L'expression d'arn antisens sf3 et la surexpression de l'arn sf3 dans des plantes transgeniques de tabac et d'arabidopsis grace aux promoteurs de pollen des genes sf3 et lat52 (isole chez la tomate), ont conduit a une alteration importante du developpement du pollen conduisant a sa mort chez de nombreuses plantes transgeniques