Modulation des activites ortho-diphenol o-methyltransferases dans des tabacs transgeniques exprimant des arn sens et antisens. Effets sur la composition en lignine et sur la resistance au virus de la mosaique du tabac

Modulation of ortho-diphenol-o-methyltransferases activities in transgenic tobaccos expressing sense and antisense rnas. Effects on the lignin composition and on the resistance to tobacco mosaic virus

• Auteur / Autrice : NOELLE FAVET
• Direction : Bernard Fritig
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1994
• Etablissement(s) : Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008)

Résumé

Les ortho-diphenol-o-methyltransferases (omt) participent au metabolisme des phenylpropanoides et methylent deux precurseurs des monolignols constitutifs de la lignine. Deux classes d'omt existent dans le tabac n. Tabacum cv. Samsun nn. Les isoformes de la classe i sont preferentiellement localisees dans les tissus vasculaires de la plante saine et sont stimulees lors de la reaction hypersensible du tabac au virus de la mosaique du tabac (vmt). Les isoformes de la classe ii, peu actives dans la plante saine, sont plus specifiques de la reaction de defense. Nous avons modifie la synthese de lignine en modulant l'activite des omt par la strategie des arn antisens. Pour chaque classe d'omt, cinq fragments couvrant l'ensemble de l'adnc ont ete introduits, en orientation antisens et sens, dans le genome de n. Tabacum cv. Samsun nn. Des populations de vingt transformants independants ont ete regenerees pour chaque construction, ainsi que des temoins non transformes et transformes par le vecteur vide, et criblees pour leur activite omt residuelle. La presence des constructions omt de classe i entraine des reductions importantes de cette activite, mais avec une frequence qui varie selon la construction. Le nombre de copies d'adn-t integrees dans le genome des transformants et la modification des teneurs en arn-m et en enzyme cible ont ete determines dans les plantes a l'activite significativement modifiee. La faiblesse de l'activite omt de classe ii dans les plantes saines transformees par les constructions de classe ii rend leur selection delicate. La reduction de l'activite omt de classe i s'accompagne d'une modification de la composition monomerique de la lignine, similaire a celle observee dans un mutant naturel de mais et directement correlee au niveau d'inhibition de cette activite. La resistance des plantes transgeniques a l'infection par le vmt ne semble pas modifiee