Interactions des proteines microtubulaires-mitochondries de cerveau : cas de la kinesine

Interactions between microtubule proteins and mitochondria from brain: case of kinesin

• Auteur / Autrice : ABDELJELIL JELLALI
• Direction : Alvaro Rendon
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées
• Date : Soutenance en 1994
• Etablissement(s) : Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008)

Résumé

Un des objectifs de ce travail est le decryptage des mecanismes moleculaires des interactions entre les microtubules et les mitochondries de cerveau de rat. Nous avons identifie les proteines du cytosquelette associees aux mitochondries et susceptibles de jouer un role dans ces interactions. A l'aide d'anticorps monoclonaux et polyclonaux, nous avons detecte l'actine, la tubuline, la synapsine i, la fodrine et la kinesine dans une fraction mitochondriale. Parmi ces proteines, nous avons etudie la kinesine dont le role biologique est d'assurer le transport axonal anterograde des organites membranaires. A l'aide d'un anticorps polyclonal reconnaissant la chaine lourde de la kinesine de drosophile, nous avons mis en evidence la presence d'une proteine de 116 kda dans la fraction mitochondriale. L'analyse de son profil electrophoretique sur gel bidimensionnel a permis de montrer qu'elle existe dans cette fraction sous de multiples isoformes. Pour confirmer son identite avec celle de la chaine lourde de la kinesine conventionnelle, nous avons determine la carte peptidique, la composition en acides amines, la sequence partielle, et l'activite atpasique ainsi que sa liaison atp-dependante aux microtubules. De plus, nous avons prepare un anticorps polyclonal dirige contre cette proteine de 116 kda, qui reconnait aussi bien la proteine de 116 kda que la chaine lourde de la kinesine soluble de cerveau de buf. L'ensemble de ces resultats montrent que la proteine de 116 kda correspond bien a la chaine lourde de la kinesine. Son extraction avec l'atp-mg#+#+ ou une faible force ionique (ki 0,2 m), avant ou apres fractionnement des mitochondries avec la digitonine, montrent que: 1) la kinesine associee aux mitochondries est une proteine perimembranaire localisee preferentiellement dans la region des points de contact membrane externe-membrane interne; 2) la tubuline associee aux mitochondries n'est pas le site de liaison a la membrane de la kinesine. Nos resultats permettent de conclure que la kinesine, et certainement d'autres proteines, qui restent a definir, seraient les composants des ponts dynamiques entre les microtubules et les mitochondries