Identification et étude de la régulation par l'AMPc et le gradient de pression osmotique de la conductance chlorure activée par hyperpolarisation d'une cellule sécrétant des stéroi͏̈des : la cellule de Leydig du testicule de rat

Identification of a hyperpolarization-activated chloride conductance located in a steroid-secreting cell, the leydig cell from rat testis, and its regulation by camp and the osmotic gradient

• Auteur / Autrice : Jean-François Noulin
• Direction : Michel Joffre
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Physiologie et pharmacologie membranaires
• Date : Soutenance en 1994
• Etablissement(s) : Poitiers

Mots clés

Mots clés contrôlés

Gonadotrophines

Testostérone

Résumé

La technique du patch-clamp a ete appliquee a la cellule de leydig qui secrete la testosterone en reponse a une stimulation par les gonadotrophines, dont le principal second messager est l'ampc. En presence de solutions symetriques de chlorure de cesium et d'ampc intracellulaire, les depolarisations a partir du potentiel membranaire de repos (-40 mv) induisent des courants chlorures sortants caracterises par une activation instantanee, suivie, pour les potentiels superieurs a +60 mv, d'une inactivation en fonction du temps. Les courants instantanes presentent des proprietes de rectification sortante. Un deplacement du potentiel de reference a +60 mv et l'utilisation d'impulsions hyperpolarisantes de durees plus importantes ont permis de montrer que ces courants sortants correspondent a des courants de deactivation d'une conductance chlorure activee par les hyperpolarisations. La relation courant d'activation en fonction du potentiel presente alors des proprietes de rectification entrante. La conductance chlorure activee en hyperpolarisation est presente sur la cellule au repos et est modulee par l'ampc, probablement par l'intermediaire de la kinase a. Cette regulation se traduit par une acceleration des cinetiques d'activation et de deactivation, par un deplacement de la courbe d'activation vers les potentiels plus positifs, par une augmentation de l'amplitude des courants entrants entre -80 mv et 0 mv, et concourt a l'augmentation du flux transmembranaire des ions chlorures dans une gamme de potentiel physiologique. Les proprietes de rectification sortante des courants instantanes de deactivation, induites par l'ampc, ont ete etudiees au niveau elementaire en configuration membrane excisee. Elles sont liees a une augmentation, par l'ampc, de la conductance elementaire dans le sens sortant, du canal chlorure. La conductance chlorure est modulee par les variations du gradient de pression osmotique. En absence comme en presence d'ampc, l'amplitude des courants est augmente par un milieu extracellulaire hypotonique et diminuee par un milieu hypertonique. Ces variations d'amplitude s'accompagnent de modifications du volume cellulaire. En presence d'ampc, la reponse de la conductance au choc hypotonique est rapide et transitoire. Les effets de l'ampc sur la conductance chlorure sont inhibes par un milieu extracellulaire hypertonique. En conclusion, ces resultats suggerent que la conductance chlorure activee en hyperpolarisation intervient comme un mecanisme regulateur de l'augmentation du volume cellulaire, cette augmentation pouvant etre induite par la liberation, via l'ampc, d'un pool osmotiquement actif de testosterone