Developpement d'outils genetiques pour l'etude des mycobacteries : transposons, vecteurs integratifs et plasmides

par CARLOS MARTIN MONTANES

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Brigitte Gicquel.

Soutenue en 1994

à Paris 7 .

mots clés

Résumé

Parmi les especes du genre mycobacterium, certaines sont des pathogenes de l'homme comme mycobacterium tuberculosis (le bacille tuberculeux). Le but du travail presente est le developpement d'outils genetiques chez des especes a croissance rapide non pathogenes afin de les utiliser ensuite chez les mycobacteries a croissance lente. Trois nouvelles sequences d'insertion, is6100, is6120 et is1137 ont ete isolees chez m. Fortuitum et m. Smegmatis. Avec un transposon compose derive de is6100, nous avons demontre pour la premiere fois la transposition chez les mycobacteries. Des vecteurs thermosensibles derives du plasmide mycobacterien pal5000, ont ete isoles. Nous avons utilise ce vecteur pour transferer tn611, un transposon compose portant deux copies de is6100. Ce systeme s'est avere fonctionnel pour construire des banques de mutants d'insertion chez m. Smegmatis. Nous avons montre que les fonctions d'integration de psam2, un plasmide isole de streptomyces, sont actives chez m. Smegmatis et peuvent etre utilisees pour l'integration d'adn heteroloque chez les mycobacteries. Nous avons montre l'utilite de is6110 pour differencier des souches de m. Tuberculosis. Nous avons contribue a la standardisation de la methode de typage en utilisant la technique de rflp

Titre traduit

New genetic tools for mycobacteria: plasmids, integrative vectors and transposons

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