Caracterisation moleculaire de la reponse humorale dans la myasthenie

Myasthenia gravis: molecular characterization of antibodies

• Auteur / Autrice : ANA CARDONA
• Direction : Jean-François Bach
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences médicales
• Date : Soutenance en 1994
• Etablissement(s) : Paris 7

Résumé

La myasthenie, est un modele de choix pour l'analyse d'une pathologie autoimmune a mediation humorale. L'objectif des travaux presentes dans ce memoire a ete d'etudier l'implication des auto anticorps anti-recepteur de l'acetylcholine (rach) dans la myasthenie et de contribuer a la caracterisation moleculaire de ceux qui sont pathogenes. Dans un premier temps nous avons mis au point une methode elisa en utilisant la lignee cellulaire te671 et des sous-unites alpha et gamma du rach que nous avons exprimes par genie genetique. Ces methodes nous ont permis d'etudier la specificite des anticorps monoclonaux humains obtenus et de detecter des autoanticorps chez les patients myastheniques. Nous avons produit et caracterise 8 anticorps monoclonaux humains anti-rach, exprimant l'isotype igg a partir des lymphocytes circulants de patients myastheniques. L'etude de la specificite fine de ces autoanticorps a ete faite en comparant plusieurs techniques (elisa, immuno-empreinte, ria et modulation antigenique). En fonction de ces criteres deux hybrides se detachent par leur capacite de moduler le rach a la surface de la lignee te671, ce qui pourrait constituer un argument en faveur de leur pathogenicite eventuelle. Pour essayer de mieux comprendre les mecanismes qui sont a la base de la pathogenicite des autoanticorps anti-rach, nous avons determine la sequence nucleotidique des arnm codant pour les parties variables des chaines lourdes et legeres de quatre des anticorps monoclonaux humains obtenus. Ces resultats ont montre: 1) l'existence d'une utilisation biaisee de certains genes vh, appartenant a la famille vh2. 2) dans le cas des anticorps mh1 et mh6, caracterises par leur capacite a moduler le rach a la surface de la lignee te671, un processus de selection dirige par l'antigene, semble probable. La possibilite d'etudier chez la souris la myasthenie experimentale dans un modele de transfert passif, nous a oriente a realiser la mise au point d'une methode electromyographique, permettant de mesurer la diminution du potentiel d'action musculaire