Recherche Avancée

Thèse soutenue

Etude de la replication et la transcription du virus de la varicelle-zona a l'aide de systemes in vitro d'expression transitoire

FR  |  
EN
Auteur / Autrice : MAJID SADEGHI-ZADEH
Direction : P. SHELDRICK
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
Date : Soutenance en 1994
Etablissement(s) : Paris 7

Résumé

FR

Pour la mise en uvre d'une etude des genes viraux impliques dans la replication de l'adn du vzv, nous nous sommes tournes vers un systeme de replication in vitro decrit par challberg. Dans ce systeme, les cellules sont co-transfectees par les genes viraux clones et une origine de replication (ori) du virus. Puisque les sequences nucleotidiques completes des genomes d'hsvlet du vzv etaient disponibles, et que les genes d'hsv1 necessaires a la replication ori-dependante in vitro etaient connus, il a ete considere probable qu'un tel systeme puisse etre developpe pour le vzv, permettant ainsi d'identifier les genes intervenant dans la replication de ce virus. Les experiences initiales indiquaient, cependant, que l'obtention d'un systeme fonctionnel pour le vzv serait plus problematique qu'il ne l'a ete pour l'hsv1, car la co-transfection avec l'adn intact du vzv n'a pas stimule de replication detectable a partir de l'ori de vzv. Les cadres de lectures ouverts pour les proteines tres precoces (ie) controlant la transcription du vzv ont donc ete separes de leurs propres promoteurs et ont ete clones en aval du promoteur ie d'hcmv. En depit du fait que ces proteines ont pu etre montrees fonctionnellement competentes dans le controle de la transcription des promoteurs des genes tres precoces, precoces et tardifs du vzv, l'addition des plasmides recombinants au systeme in vitro n'a pas fourni de taux detectable de replication. En suivant une autre approche, le promoteur ie d'hcmv a ete alors utilise pour diriger l'expression des genes vzv homologues d4hsv1, mais les resultats, ont encore ete negatifs