Regulation des syntheses de prostaglandines dans la cellule epitheliale de l'endometre ovin. Effet de l'interferon embryonnaire (ifn-tau ou otp)

• Auteur / Autrice : JEAN-PHILIPPE TAMBY, René Ozon
• Direction : Gilles Charpigny
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1994
• Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

Les mecanismes de regulation des syntheses de prostaglandines sont etudies dans les cellules de l'epithelium endometrial ovin en culture primaire. L'intervention de l'interferon embryonnaire (otp) dans ces mecanismes est precisee. Les conditions de culture des cellules epitheliales des glandes uterines sont etablies. La confluence est obtenue apres 5-6 jours ; la croissance des cellules differe selon l'etat endocrinien des animaux. La quantite de proteines cellulaires caracterise le mieux une colonie confluente de cellules epitheliales. La chromatographie liquide a haute performance montre que 95% de l'acide arachidonique est incorpore dans les phosphatidylethanolamines, les phosphatidylserines et les phosphatidylcholines. Parmi eux, les plasmalogenes d'ethanolamine constituent la forme majoritaire qui esterifie l'acide arachidonique. Le stockage de l'acide arachidonique est plus important dans les plasmalogenes des cellules de brebis gestantes par comparaison a celles de brebis non gestantes. Les cellules epitheliales forment presqu'exclusivement des prostaglandines f2 et e2. La secretion par les cellules de brebis non gravides est superieure a celles de brebis gravides. La synthese de prostaglandine-f2, determinee par dosage radio-immunologique, est stimulee par l'addition d'acide arachidonique dans le milieu de culture. L'utilisation de la mepacrine, inhibiteur de la phospholipase-a2, indique que l'acide arachidonique est esterifie dans les phospholipides avant sa conversion en prostaglandines. L'ocytocine stimule la secretion de prostaglandine-f2 des cellules provenant uniquement de brebis en cycle. L'emploi d'un analogue du dag ou des esters de phorbol demontre l'implication de la pkc dans la stimulation des secretions de prostaglandines. Ce processus necessite une neosynthese de proteines. A l'aide d'anticorps monoclonaux, nous mettons en evidence l'induction de la cyclooxygenase-2, forme inductible de la prostaglandine synthetase, sans modification des quantites de cyclooxygenase-1, forme constitutive de l'enzyme. L'otp reduit la secretion basale de prostaglandine-f2. Elle empeche la stimulation par l'ocytocine et les analogues du dag, suggerant qu'elle bloque l'effet stimulant de l'activation de la pkc. L'action de l'otp n'affecte pas l'incorporation d'acide arachidonique dans les phospholipides. Cependant, elle modifie la conversion du precurseur probablement en agissant sur la cyclooxygenase. La reduction de l'activite phospholipase-a2 qui se produit en debut de gestation est due a l'inhibition competitive de la phospholipase-a2 dans l'endometre des brebis gravides. Nous suggerons que cette inhibition peut etre induite par l'otp