Caracterisation du mecanisme d'adsorption de l'albumine sur des supports a polarite de phases inversee par chromatographie et spectrometrie infrarouge a transformee de fourier

Characterization of albumin adsorption on reversed-phase supports by chromatography and fourier transform infrared spectrometry

• Auteur / Autrice : LAHOUSSINE BOULKANZ
• Direction : C. VIDAL MADJAR
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1994
• Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

L'adsorption de l'albumine de serum humain (ash) sur un support pour chromatographie a polarite de phases inversee (rpc) a ete etudiee par deux techniques complementaires: la chromatographie liquide a haute performance (clhp), caracterisant le processus cinetique d'adsorption et la spectrometrie infrarouge a transformee de fourier (irtf) donnant des informations sur la structure moleculaire de cette proteine a l'etat adsorbe sur des supports de silice greffes de chaines hexyle (rpc6) et a l'etat solvate dans du tampon phosphate contenant des teneurs variables en acetonitrile. Une diminution importante de la constante apparente d'adsorption est observee avec l'addition de modifiant organique dans l'eluant. Cet effet depend de la nature de l'additif organique. La contribution du processus chimique d'adsorption au transfert de matiere global est du meme ordre de grandeur que celle de la diffusion dans le fluide stagnant present dans l'espace intraparticulaire ou dans les tubes reliant la colonne a l'appareillage. Pour ash en solution ou ash adsorbee, les resultats structuraux obtenus par irtf s'appuient sur l'analyse du profil d'adsorption des bandes amide i relatives aux carbonyles peptidiques. L'etude infrarouge revele que l'acetonitrile modifie la structure de la proteine en solution. A l'etat adsorbe, la structure de la proteine est aussi perturbee, avec environ 12% du squelette polypeptidique concerne par la destructuration