Etude de trois nouveaux genes impliques dans le metabolisme d'acides gras de la mitochondrie chez la levure saccharomyces cerevisiae

The study of three new genes involved in the metabolism of fatty acids of mitochondria in the yeast saccharomyces cerevisiae

• Auteur / Autrice : ALEXIS HARINGTON
• Direction : P. Slonimski
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1994
• Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

Cette these concerne l'analyse d'une collection de mutants pet saccharomyces cerevisiae. Deux mutants thermosensibles, mna 2-2 et mna7-1, ont ete etudies. La mutation mna2-2 touche le gene mif4 qui code la proteine chaperone hsp60 et provoque l'absence des transcrits des genes mitochondriaux cox1 et cytb. L'allele mna2-2 a ete une des premieres mutations conditionnelles localisees dans ce gene essentiel. Le gene mna7 a ete clone et sequence. La sequence montre une forte homologie avec plusieurs membres procaryote d'une classe d'enzymes impliques dans la synthese des acides gras, les beta cetoacyl synthethases. Le gene mna7 a donc ete renomme cem1 (condensing enzyme with mitochondrial function). La disruption de ce gene abolit la capacite de respirer et entraine l'absence des cytochromes b et aa3 mais n'affecte pas la synthese des proteines mitochondriales majeures. Un suppresseur du gene cem1, fam1-1 (fatty acid mitochondrial) a ete isole. Ce suppresseur, a croissance thermosensible, restaure la presence des cytochromes b et aa3, mais ne restaure pas completement la capacite de consommer de l'oxygene. Le gene fam1 a ete clone et sequence. La sequence de la proteine derivee est tres homologue aux acyl coa ligases des acides gras a chaines longues, un groupe d'enzymes qui peuvent activer les acides gras. L'allele sauvage (fam1) a aussi ete clone et sequence. La mutation suppresseur cree un codon d'initiation en amont du debut du gene sauvage ainsi creant une presequence qui permet l'importation de la proteine dans la mitochondrie. La disruption de fam1 montre qu'il n'est pas essentiel et n'a pas d'effet phenotypique sur la respiration. Un gene (nomme mac1 dans ce travail), code une acyl carrier protein (acp) qui montre une forte similarite avec l'acp mitochondriale de neurospora. La disruption de ce gene a des effets tres nefastes pour la viabilite de la cellule en general et mene a la perte du genome mitochondrial (petite). Les recherches exposees dans cette these ont permis l'identification et la caracterisation de trois nouveaux genes qui sont importants a la fonction respiratoire de la levure