Electrode a peroxydase, application a l'analyse du cholesterol

Peroxidase electrode, application for cholesterol determination

• Auteur / Autrice : LAURENCE EMERIAU CHARPENTIER
• Direction : Nabil El Murr
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1994
• Etablissement(s) : Nantes

Résumé

Cette these a consiste en la realisation d'un capteur electrochimique enzymatique capable de detecter de facon selective et rapide le cholesterol, substance importante en ce qui concerne le suivi de la sante humaine. Les difficultes que nous avons rencontrees pour sa detection directe nous ont amenes a mettre au point une electrode a peroxydase permettant la detection et le dosage du peroxyde d'hydrogene, intermediaire forme au cours de l'oxydation enzymatique du cholesterol. Le dosage de cet intermediaire a d'abord ete realise avec la peroxydase en solution. La mise en evidence de reactions parasites competitives comme la dismutation du peroxyde d'hydrogene, nous a conduit a fabriquer une electrode a peroxydase a surface renouvelable contenant dans sa masse tous les elements necessaires au dosage. Cette electrode nous a permis par la suite de detecter et doser le cholesterol, d'abord sous forme libre dans un milieu simple, puis sous forme esterifiee dans un serum standardise en utilisant deux enzymes specifiques du cholesterol, a savoir la cholesterol esterase et la cholesterol oxydase. L'utilisation d'un tel capteur a des fins analytiques a egalement ete etudiee dans des serums et des jaunes d'oeufs. Une amelioration notable a ete apportee par rapport aux techniques usuelles spectrophotometriques puisqu'une analyse peut etre realisee en trente secondes seulement et ceci sans extraction prealable ni periode d'incubation