Thèse soutenue

Détection de Mycoplasma hyopneumoniae chez le porc par la technique d'amplification enzymatique de gènes (PCR) : étude de l'hétérogénéité des souches de Mycoplasma hyopneumoniae

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Auteur / Autrice : Béatrice Blanchard
Direction : Joseph Marie Bové
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Sciences biologiques et médicales
Date : Soutenance en 1994
Etablissement(s) : Bordeaux 2

Résumé

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L'objectif du travail présenté dans ce mémoire, a été de localiser les sites de multiplication de M. Hypopneumoniae et de rechercher les sites de prélèvements intéressants pour le diagnostic. Cette étude, réalisée en microscopie électronique, a permis de mettre en évidence le rôle prépondérant des relations entre l'épithélium trachéal et M. Pneumoniae et de mettre au point un modèle in vitro utilisant les anneaux de trachée de porc. Le second objectif du travail a été de mettre au point de nouvelles techniques de diagnostic afin d'améliorer la spécificité et la sensibilité des tests de diagnostic. La sonde d'ADN spécifique 1141 oibtenue au laboratoire permet de détexcter 3 105 organismes et de rechercher M. Pneumoniae à partir de l'ADN extrait des lavages trachéobronchiques. La sensibilité du test de détection avec la technique PCR a été augmentée de 1000 fois (4 102 organimes). Ce test permet de détecter M. Pneumoniae dans les lavages trachéobronchiques sans extraction d'ADN. Au cours de la mise en oeuvre de ce test, une hétérogénéité génomique des souches de M. Pneumoniae de référence par rappoort aux souches du terrain, a été mise en évidence. L'étude de cette hétérogénéité a permis d'identifier les gènes délétés chez les souches de référence et de connaître les protéines pour lesquelles ils codent. Ces protéines se révèlent homologues aux protéines de transport identifiées chez les bactéries tel que E. Coli.