Le FBBG, une mucine membranaire, marqueur d'hyperpolarisation et de différenciation des entérocytes

The filamentous brush border glycocalyx, a mucin-type glycoprotein, marker of enterocytes hyperpolarization and differentiation

• Auteur / Autrice : Jacques Maury
• Direction : Suzanne Maroux
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biochimie - option nutrition "aspects moléculaires et cellulaires"
• Date : Soutenance en 1994
• Etablissement(s) : Aix-Marseille 3

Mots clés

Mots clés contrôlés

Mucines

Épithélium

Muqueuse de l'intestin grêle

Résumé

La protection des epithelia contre les agressions exterieures telles que les infections parasitaires, bacteriennes, et virales, est essentiellement assuree par la couche de mucus secretee par des cellules epitheliales specialisees. Des observations en microscopie electronique montrent toutefois que de nombreux epithelia, et en particulier l'epithelium intestinal, sont egalement recouverts par un reseau de glycoconjugues filamenteux implantes dans la membrane apicale des cellules epitheliales, que nous avons appele dans le cas des cellules absorbantes intestinales, le glycocalyx filamenteux de la bordure en brosse ou fbbg. De tres faibles quantites d'un glycoconjugue de poids moleculaire apparent de 400 kda ont ete purifiees a partir de vesicules de bordure en brosse. Un anticorps monoclonal, le 3a4, qui reconnait un epitope glycosidique specifique de la glycoproteine de 400 kda en immunoempreinte a ete produit. Cet anticorps a permis de montrer par immunomarquage de coupes d'intestin, que seul le fbbg est immunorevele, et qu'il est exclusivement ancre dans le microdomaine membranaire situe au sommet des microvillosites, ce qui confere aux enterocytes, le caractere de cellules epitheliales hyperpolarisees. L'immunopurification du fbbg, par l'anticorps 3a4, a permis de montrer que la glycoproteine de 400 kda est l'unique constituant du fbbg. Sa caracterisation biochimique montre que c'est une glycoproteine membranaire fortement glycosylee, puisque la chaine peptidique, qui contient 40% de residu de serine et threonine, ne represente que 27% de la masse moleculaire. Le fbbg possede les caracteristiques biochimiques des glycoproteines regroupees au sein de la famille des glycoproteines de type mucine. Son expression et sa glycosylation au cours de la differenciation enterocytaire le long de l'axe crypte-villosite ont ete abordees. Des etudes d'immunomarquage de surface et de coupes de tissus ont permis de montrer que le nombre d'enterocytes qui synthetise un fbbg portant l'antigenicite 3a4 peut varier de 100 a 0%. La distribution en mosaique des enterocytes exprimant ou non l'antigenicite 3a4 sur les villosites, associee a la monoclonalite des cellules des cryptes et a la migration lineaire des enterocytes le long des villosites, suggerent que les enterocytes d'une meme crypte peuvent suivre un programme de differenciation heterogene. L'etude de l'expression hyperpolarisee du fbbg par l'anticorps 3a4, le long de l'axe crypto-villositaire, a permis de mettre en evidence trois etapes distinctes de la differenciation enterocytaire