Etude du cotransporteur sodium/glucose sur les cellules HT-29-D4 en culture

Study of the sodium/Glucose cotransporter in the HT-29-D4 cell line

• Auteur / Autrice : Olivier Delezay
• Direction : Jean Mauchamp
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie cellulaire et microbiologie
• Date : Soutenance en 1994
• Etablissement(s) : Aix-Marseille 2
• Partenaire(s) de recherche : Autre partenaire : Université d'Aix-Marseille II. Faculté des sciences (1969-2011)

Résumé

Le cotransporteur sodium/glucose est responsable de l'absorption du glucose et du galactose au niveau de la cellule absorbante intestinale (enterocyte). L'etude de ce transporteur a ete entreprise in vitro sur des cellules issues d'un adenocarcinome colique humain: les cellules ht-29-d4. Ces cellules possedent la propriete de se differencier en culture et presentent, lorsqu'elles sont differenciees, des analogies morphologiques et biochimiques avec l'enterocyte. Les proprietes fonctionnelles et biochimiques du cotransporteur ont ete caracterisees sur les cellules ht-29-d4 differenciees. Le cotransporteur qui est localise sur la membrane apicale de ces cellules (cote muqueux) possede des proprietes biophysiques similaires a celles decrites pour l'epithelium intestinal. L'analyse des parametres electrophysiologiques revele que le cotransporteur est responsable de la difference de potentiel transepitheliale de la monocouche formee par ces cellules. L'etude du cotransporteur au cours de la differenciation des cellules ht-29-d4 montre que la fonction de cotransport sodium/glucose est en relation directe avec la differenciation de ces cellules. Cependant, les cellules indifferenciees expriment l'arn messager du cotransporteur et la proteine correspondante. La localisation de cette proteine en immunofluorescence montre qu'elle est localise sur la membrane apicale des cellules differenciees mais qu'elle reste confinee a l'interieur de la cellule indifferenciee. Enfin, l'importance de la proteine kinase c dans l'adressage du cotransporteur au niveau de la membrane plasmique est demontree. L'ensemble des resultats obtenus suggere que les cellules ht-29-d4 synthetisent le cotransporteur sodium/glucose quelque soit l'etat de differenciation de la cellule et que la mise en place de la fonction depend d'evenements intracellulaires dans lesquels la proteine kinase c est impliquee