Thèse soutenue

La protéine p27 de groupe des rétrovirus aviaires : production d'anticorps monoclonaux et étude de l'antigénicité

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Auteur / Autrice : Franck Guyonnet
Direction : Ginette Dambrine
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Sciences de la vie
Date : Soutenance en 1993
Etablissement(s) : Tours
Jury : Président / Présidente : Alain Goudeau
Rapporteurs / Rapporteuses : Jeanne Grosclaude, Claude Chastel

Résumé

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La protéine p27 de groupe des rétrovirus aviaires a été purifiée à partir du virus exogène AMV(MAV)B, par électrophorèse préparative et électroélution. Les caractérisations biochimiques et immunologiques de cette protéine ont confirmé le polymorphisme structural que présente ce constituant majeur de la capside virale. Une collection de 320 anticorps monoclonaux dirigés contre cette protéine a été isolée et l'étude de la distinction entre les virus exogènes et endogènes de leucoses aviaires à l'aide de ces anticorps a été effectuée. L'un d'entre eux réagit spécifiquement avec les virus exogènes et présente une affinité suffisante pour la détection de la protéine p27 exogène. Une cartographie épitopique de la protéine p27 exogène à l'aide d'anticorps monoclonaux a été réalisée par clivage chimique de l'antigène et identification des fragments peptidiques, ainsi qu'avec un système BIA-core basé sur l'analyse des interactions biospécifiques par résonance plasmonique de surface. Nous avons déterminé respectivement huit et onze épitopes différents à l'aide de ces deux méthodes. En particulier, deux anticorps monoclonaux sont dirigés contre une région de la protéine p27 présentant une épitope spécifique de la forme exogène et un épitope spécifique du virus AMV(MAV)B. A l'aide de programmes de prédictions d'épitopes, un oligopeptide de 25 acides aminés situé dans la région cooh-terminale de la protéine a été synthetisé et les résultats montrent qu'il comporte plusieurs épitopes, dont l'épitope discriminant les formes exogènes et endogènes de protéine p27. Ces travaux ont apporté des données relatives à l'antigénicité de la protéine p27 exogène et des outils de détection des rétrovirus aviaires exogènes.