Utilisation des souris transgeniques et des cellules souches embryonnaires dans le cadre de l'etude du gene cftr (cystic fibrosis transmembrane conductance regulator) et de la construction d'unn modele murin pour la mucoviscidose

Use of transgenic mice and embryonic stem cells to study the regulation of the gene coding for the cftr protein and to generate a mouse model for cystic fibrosis

• Auteur / Autrice : CECILE CHARTIER
• Direction : Pierre Chambon
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences médicales
• Date : Soutenance en 1993
• Etablissement(s) : Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008)

Résumé

La mucoviscidose est une maladie genetique letale dont l'incidence est particulierement elevee dans les populations caucasiennes ou elle atteint environ 1 individu sur 2500. Elle est causee par des mutations du gene cftr (cystic fibrosis membrane conductance regulator) dont la plus frequente, presente sur environ 70% des chromosomes des malades, est la deletion de la phenylalanine en position 508 (f508). Des souris transgeniques ont ete generees pour etudier la specificite tissulaire de l'activite du promoteur du gene cftr et la relation structure-fonction de la proteine cftr-f508 et pour construire un modele murin pour la mucoviscidose. L'expression du transgene de fusion promoteur cftr humain/antigene t de sv40 induit la formation d'ependymomes issus de tumeurs primitives du neuroepithelium. Ceci suggere que la region promotrice correspondant a la sequence 5 non codante (2244 a +24) du gene cftr est active des le stade foetal au niveau des precurseurs des cellules ependymaires. Les souris transgeniques exprimant cftr ou cftr-f508 humains de facon ubiquitaire ou ciblee ne developpent aucune pathologie signification. Ce resultat demontre la non-toxicite de l'expression de cftr normal et f508. Pour construire le modele animal, le ciblage du gene cftr murin a ete realise par recombinaison homologue dans les cellules souches embryonnaires (es), et des souris chimeres ont ete generees par microinjection des cellules es modifiees dans des blastocystes de souris. Latransmission par la lignee germinal est actuellemnt testee/df508 humains de facon ubiquitaire ou ciblee ne developpent aucune pathologie significative. Ce resultat demontre la non-toxicite de l'expression de cftr normal et f508. Pour construire le modele animal, le ciblage du gene cftr murin a ete realise par recombinaison homologue dans les cellules souches embryonnaires (es), et des souris chimeres ont ete generees par microinjection des cellules es modifiees dans des blastocystes de souris. La transmission par la lignee germinale est actuellement testee