Expression de peptides antibacteriens d'insectes dans des systemes heterologues

Expression of insect antibacterial peptides in heterologous systems

• Auteur / Autrice : Isabelle Petit, J.-M. REICHNART
• Direction : T. ACHSTETTER
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées
• Date : Soutenance en 1993
• Etablissement(s) : Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008)

Résumé

Les insectes superieurs font face aux agressions bacteriennes grace a un mecanisme de defense tres efficace impliquant la synthese de plusieurs familles de peptides antibacteriens a large spectre d'activite. Au laboratoire, 3 familles de peptides antibacteriens ont ete recemment isolees: les defensines, presentant 3 ponts disulfures; la drosocine et les diptericines, peptides o-glycolyses. La structure de ces peptides ne permet pas une synthese chimique aisee. Vu leur interet potentiel, nous avons choisi d'exprimer les genes de ces molecules dans un systeme heterologue. Nous avons realise l'expression des defensines d'insectes en fusion avec le precurseur du facteur dans la levure. Nous avons ainsi obtenu la production de defensine recombinante identique a la defensine native. Dans certains cas, la coamplification du gene kex2 de levure a permis d'ameliorer la production. La drosocine et la diptericine natives ont une activite antibacterienne liee a leur o-glycosylation. La drosocine recombinante est glycosylee mais la substitution est differente de celle du peptide natif. La dipteridine est produite par la levure en faible quantite. Nous avons choisi un autre systeme d'expression, le baculovirus. La diptericine obtenue est inactive. La levure apparait comme un excellent systeme pour la production de defensines d'insectes mais n'a pas permis d'obtenir la production de peptides avec les memes modifications post-traductionnelles que celles des peptides natifs