Etude de l'acétolactate synthase (E. C. 4. 1. 3. 18) extraite de végétaux : mécanismes de catalyse et d'inhibition

Acetolactate synthase (ec 4. 1. 3. 18) extracted from plants: studies of catalysis and inhibition mechanisms

• Auteur / Autrice : Christophe Roux
• Direction : Jean Bastide
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Agrochimie
• Date : Soutenance en 1993
• Etablissement(s) : Perpignan

Mots clés

Mots clés contrôlés

Herbicides

Antienzymes

Biosynthèse

Acides aminés à chaîne ramifiée

Résumé

L'acétolactate synthase (als), première enzyme commune à la biosynthèse des acides aminés ramifiés, a été extraite d'orge ou de maïs et partiellement purifiée. Les études réalisées sur le mécanisme catalytique concernent la forte liaison de la thiamine pyrophosphate (tpp) sur l'als, l'identification d'un intermédiaire réactionnel (lactylthiamine pyrophosphate), et l'activation de l'als par le fad. A partir de ces données, l'inhibition de cette enzyme par les sulfonylurées a été étudiée. Ces herbicides ne se fixent pas sur le site thiaminique de l'enzyme, comme l'ont montré les études de compétition avec un inhibiteur de l'als compétitif du tpp (thiamine thiazolone pyrophosphate). L'utilisation du monomère de l'als a permis de mettre en évidence l'interaction entre le fad et les sulfonylurées sur l'enzyme. Cette interaction peut être reliée à l'inhibition lente observée en cinétique avec ces inhibiteurs. Nous proposons un mécanisme d'inhibition de l'als par ces herbicides dans lequel la sulfonylurée est en compétition avec le fad pour la protection d'un carbanion intermédiaire réactionnel, aboutissant à la formation d'un dérive de la thiamine lentement dissocie. Dans ces conditions, le relargage de la sulfonylurée n'entraine pas la réactivation de l'enzyme