Recherche de marqueurs moleculaires de la production de latex et de sa stimulation par l'ethylene chez hevea brasiliensis

Search for molecular markers of latex production and its stimulation by ethylene in hevea brasiliensis

• Auteur / Autrice : Valérie Pujade-Renaud
• Direction : Jean Guern
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1993
• Etablissement(s) : Paris 11

Résumé

L'apport d'ethylene sous forme d'ethephon stimule la production de caoutchouc chez hevea brasiliensis, en prolongeant l'ecoulement du latex lors de la saignee et en stimulant le metabolisme implique dans la regeneration du latex. La recherche de marqueurs moleculaires de la production de latex nous a conduits a etudier l'effet de l'ethylene sur l'expression des genes dans les laticiferes. La technique de traduction in vitro a permis de demontrer que l'expression de plusieurs genes etait specifiquement modifiee par l'ethylene, dans le sens d'une stimulation pour certains et d'une repression pour d'autres. En se basant sur les connaissances physiologiques et biochimiques concernant les laticiferes ainsi que sur les donnees bibliographiques concernant les genes sous controle de l'ethylene dans d'autres systemes vegetaux, une selection de sondes a ete realisee puis testee par hybridation en northern blot. Huit sondes ont donne un signal d'hybridation sans ambiguite. Les sondes codant pour une superoxyde dismutase a noyau mn, une chitinase, une heveine, une glutamine synthetase, une glycin rich protein et une extensine ont revele une accumulation des messagers correspondants dans le latex. Les niveaux de transcrits reveles par les sondes codant pour une calmoduline et une proteine kinase ne sont pas modifies. La glutamine synthetase (gs) a ete plus particulierement etudiee. Une banque d'adnc de latex issu d'arbres traites a l'ethephon a ete construite. Un clone isole par criblage de la banque au moyen d'une sonde heterologue de gs a ete sequence et s'est avere correspondre a un clone pleine longueur codant pour une gs cytosolique