Caracterisation du gene reca de lactococcus lactis

Characterization of the gene reca of lactococcus lactis

• Auteur / Autrice : PATRICK DUWAT
• Direction : Alexandra Gruss
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1993
• Etablissement(s) : Paris 11

Résumé

Le developpement industriel des bacteries lactiques (lab) necessite une bonne comprehension des phenomenes de stabilite genetique et des reponses de ces bacteries aux agressions de l'environnement. Chez les procaryotes, un element clef de la recombinaison homologue et de la reponse a l'endommagement de l'adn est code par le gene reca. Nous avons developpe une methode basee sur l'amplification par polymerisation en chaine qui a conduit au clonage de 13 fragments internes de genes reca de bacteries a gram positif. Les donnees, obtenues par la comparaison de ces fragments avec les proteines reca precedemment caracterisees, suggerent qu'il existe des differences fonctionnelles entre les proteines reca provenant de bacteries a gram negatif et celles provenant de bacteries a gram positif. L'utilisation du fragment interne du gene reca de lactococcus lactis a permis le clonage et le sequencage de l'integralite de ce gene. L'analyse transcriptionnelle du gene reca a montre qu'il existe un couplage transcriptionnel entre le gene reca et le gene situe en amont codant pour la formamidopyrimidine-dna-glycosylase, une proteine de reparation de dommages oxydatifs au niveau de l'adn. La caracterisation de la souche reca#, obtenue par remplacement de l'allele sauvage par une copie inactivee du gene reca, a montre que cette souche est incapable de faire efficacement de la recombinaison homologue ou de reparer son adn. De plus, cette souche est aussi incapable de repondre efficacement a un stress oxydatif ou a un choc thermique. Ces resultats constituent la premiere caracterisation d'un gene reca de bacterie lactique. Ils suggerent que la premiere fonction de la proteine reca dans l. Lactis serait de permettre a la cellule de repondre efficacement aux stress. Les modeles permettant d'expliquer ce role important de reca sont presentes en fin de ce manuscrit