Etude de la phosphorylation de la P56Ick et détection des sites de phosphorylation par les voies de signalisation CD4 et TcR/CD3 dans les cellules T

Studies on the phosphorylation of P56Ick and detection of the phosphorylation sites induced by triggering T cells through CD4 and TcR/CD3

• Auteur / Autrice : Mahdhia Soula-Rothhut
• Direction : Siegmund Fischer, Remi Fagard
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Immunologie
• Date : Soutenance en 1993
• Etablissement(s) : Paris 7

Mots clés

Mots clés contrôlés

Antigènes CD3

Protéines de l'enveloppe virale

Protein-tyrosine kinases

Récepteurs aux antigènes des cellules T

Antigène CD4

VIH (virus)

Glycoprotéines

Phosphorylation

Lymphocytes T

Transduction du signal cellulaire

Mots clés libres

Activité enzymatique

Nw

Résumé

Dans cette thèse nous avons analysé les mécanismes de phosphorylation de la p56Ick et son activité kinase après stimulation des cellules Jurkat par des anticorps anti-CD4, les gp160 ou gp 120 du VIH et des anticorps anti-TcR/CD3. Nous avons essayé de rapprocher ce phénomène avec un modèle d'adhésion nécessitant la voie du CD4 et un modèle de sécrétion de cytokines (IL-2) par la stimulation du TcR/CD3. Ces deux voies de signalisation n'induisent pas le même effet cellulaire (IPs, Ca⁺⁺ prolifération), mais le point commun réside dans la phosphorylation de la p56Ick. Nous avons démontré que les lymphocytes T stimules par l'anticorps anti-cd4 ou la gp160 et ou la gp120 du VIH, augmentent l'activité kinase de p56Ick et augmentent la phosphorylation des sites tyrosine et serine. Cette augmentation s'effectue très rapidement dès les premières minutes qui suivent la stimulation sans changement de poids moléculaire de la p56Ick. L'utilisation d'un modèle d'adhésion montre que la voie CD4 induit un signal négatif qui nécessite l'hyperphosphorylation de la p56Ick. Une stimulation par la voie TcR/CD3 induit une modification des sites de phosphorylation sur serine et tyrosine associée avec un changement du poids moléculaire de la p56Ick. Par l'utilisation d'un inhibiteur de PKC nous avons analysé la forme de haut poids moléculaire et détermine les sites impliques dans la modification de l'état de phosphorylation de la molécule induit par la stimulation via CD3 et par le PMA. Ces deux sites de phosphorylation sont différents mais situes dans le même domaine SH2 de la kinase.