Purification et caracterisation de nouvelles aminopeptidases; utilisation en synthese peptidique

• Auteur / Autrice : IRIS YOSHPE-BESANCON
• Direction : BRUNO RIBADEAU-DUMAS
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1993
• Etablissement(s) : Paris 7

Résumé

Le but de ce travail etait d'etudier la possibilite et l'interet d'utiliser des aminopeptidases en synthese peptidique. Quatre aminopeptidases bacteriennes ont ete isolees et partiellement caracterisees. Deux d'entre elles, de specificite interessante, ont ete utilisees en synthese peptidique. Leur specificite et l'influence des parametres reactionnels ont ete etudies afin d'evaluer ces enzymes en tant qu'outils pour la synthese peptidique. L'aminopeptidase a (apa) est une metalloprotease qui libere de peptides l'acide amine n-terminal asp ou glu. Elle a ete utilisee pour effectuer la synthese sous controle thermodynamique de derives d'acides amines et de peptides. Mettant a profit le fait que l'apa accepte aussi l'acide malique n-terminal nous l'avons employee pour la protection des groupements alpha-amine de peptides. La x-prolyl dipeptidyl aminopeptidase (pepx) est une protease a serine qui libere le dipeptide x-pro n-terminal de peptides. Cette enzyme a permis la synthese sous controle cinetique de liaisons peptidiques impliquant la proline. Des hypotheses concernant le mecanisme de la transpeptidation catalysee par pepx sont proposees. Notre travail demontre que des aminopeptidases sont des outils efficaces pour la synthese peptidique. Deux nouvelles enzymes de specificites interessantes s'ajoutent maintenant a l'arsenal restreint des proteases actuellement utilisees en synthese peptidique