Effets d'un terminateur de replication sur la stabilite des plasmides chez escherichia coli

Effects of a replication terminator on plasmid stability in escherichia coli

• Auteur / Autrice : Hélène Bierne
• Direction : Bénédicte Michel
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1993
• Etablissement(s) : Paris 7

Résumé

Des rearrangements genetiques, dont des deletions, sont produits par recombinaison illegitime. Differents mecanismes correspondant a des erreurs d'enzymes qui coupent et joignent l'adn ou qui le repliquent seraient a l'origine de ces rearrangements. Lorsque la replication de l'adn est arretee, des structures aptes a recombiner sont generees. Nous avons teste l'eventuel role d'arrets de replication sur la formation de deletions. Des plasmides portant le terminateur de replication terb du chromosome d'escherichia coli ont ete utilises comme modeles experimentaux. Nous avons observe deux effets de terb sur l'instabilite de ces plasmides. Un premier systeme experimental a permis l'etude de deletions produites par jonction de sequences sans homologie. Des plasmides hybrides constitues par un phage filamenteux et un derive du plasmide pbr subissent des deletions. Une des sequences jointes lors de la deletion, l'origine de replication du phage, est un site de coupure simpl-brin. Lorsque terb arrete la replication de la molecule parentale, la majorite des deletions resultent de la jonction entre cette origine et le terminateur. Le blocage d'une fourche de replication peut donc etre a l'origine de rearrangements de l'adn. Terb n'a en revanche pas d'effet direct sur la recombinaison entre de courtes sequences repetees plasmidiques. Cependant, en sa presence, la frequence d'apparition de cellules recombinantes est cinq cents fois plus elevee. L'arret de la replication provoque la diminution du nombre de copies du plasmide parental et ceci confere un avantage replicatif au recombinant depourvu du terb