La valyl-arnt synthetase d'eucaryotes superieurs est associee ave le facteur d'elongation eef-1h : caracterisation structurale et fonctionnelle du complexe
Auteur / Autrice : | GUILLAUME BEC |
Direction : | Jean-Pierre Waller |
Type : | Thèse de doctorat |
Discipline(s) : | Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie |
Date : | Soutenance en 1993 |
Etablissement(s) : | Paris 7 |
Résumé
Chez les eucaryotes superieurs, la valyl-arnt synthetase (valrs) est associee au facteur d'elongation eef-1h. Afin de preciser les bases structurales et fonctionnelles de cette association, nous avons purifie ce complexe a partir de plusieurs mammiferes et d'un batracien, demontrant ainsi le caractere ubiquitaire de cet edifice multiproteique chez les eucaryotes superieurs. La dissociation du complexe en ses sous-unites elementaires (valrs, eef-1 alpha, -beta, -gamma et -delta) a permis de preciser les caracteristiques fonctionnelles de chacune des sous-unites. Le role essentiel de eef-1 delta dans l'assemblage du complexe valrs-eef-1h a ete mis en evidence par des experiences de reconstitution. D'autre part, nous avons montre que le domaine n-terminal hydrophobe de la valrs, excisable par proteolise menagee sans affecter l'activite de l'enzyme, est indispensable a son integration en complexe. Sur la base de ces donnees, nous proposons un modele d'agencement des differents constituants au sein du complexe. Enfin, nous avons montre que la sous-unite eef-1 gamma du complexe est phosphorylee in vitro par la kinase p34cdc2, et in vivo lors de l'activation de la kinase concomitante avec la maturation des oocytes de xenope. Cette propriete pourrait constituer un des evenements qui conduit a la regulation coordonnee de la biosynthese des proteines et de la division cellulaire