Etude du pea seed borne mosaic virus dans la graine de pois. Variabilite de sequence et de structure de la proteine capside. Construction d'un adnc complet en vue d'une etude de la transmission par la graine

Study of pea seed borne mosaic virus inpea seeds. Sequence and structure variability of the viral capside protein. Construction of a complete cdna clone in view to study the transmission mechanism by seeds

• Auteur / Autrice : KHALED MASMOUDI
• Direction : Yves Maury
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1993
• Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

Le pea seed borne mosaic virus (psbmv) est un potyvirus du pois transmis par la semence et par les pucerons ; la transmission par la graine, a des frequences parfois elevees, constitue le facteur cle dans l'epidemiologie de cette maladie. L'objectif agronomique de ce travail a, par la suite, consiste a perfectionner et simplifier une methode de rejet des lots de semence infectes, en utilisant la technique elisa, l'analyse par groupes de graines et une demarche statistique incluant les probabilites d'erreurs. La serologie ne permet pas, en general, de distinguer le virus transmissible par la graine (celui des embryons) du virus non transmissible (celui des teguments). L'analyse comparee de la proteine capside dans ces deux tissus a permis de realiser pour la premiere fois cette differenciation: la forme native (33kd) est convertie dans les teguments en une forme tronquee (27kd) par une activite proteolytique induite dans ce tissu au moment de la croissance active de l'embryon ; des anticorps specifiques de la partie n-terminale eliminee ne reconnaissent donc le virus que dans les embryons. Cette approche renforce l'importance de la variabilite du virus: une souche tres faiblement detectee par ces anticorps a ete reperee. Le sequencage de son gene capside a confirme qu'il s'agit bien d'une souche de psbmv, distante de la souche standard, avec un pourcentage d'homologie (en acides amines) de 79% pour la partie n-terminale, et de 93,8% pour l'ensemble de la capside. La souche standard a, par rapport aux deux souches connues, une homologie de plus de 98%. Une copie adnc complete de l'arn de cette souche standard a ete construite ; elle devrait, a terme, permettre d'etudier les determinants viraux de la transmission du psbmv par la graine