Thèse soutenue

Regulation du developpement d'embryons somatiques de vigne par des proteines extracellulaires dont la secretion est sous controle hormonal
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Auteur / Autrice : Olivier Maes
Direction : Jean Guern
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
Date : Soutenance en 1993
Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

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Les suspensions embryogenes de vigne secretent des proteines dans leur milieu de culture. Cette secretion est sous le controle de l'auxine. En absence d'auxine, des proteines de 9 a 66 kda sont secretees par des embryons bloques au stade cur. Pour obtenir un developpement jusqu'au stade cotyledonaire, les cultures doivent etre inoculees a une faible densite de population cellulaire inferieure a 5000 cellules par ml, ce qui coincide avec la disparition des proteines extracellulaires de 31, 34, 48 et 52 kda. Les proteines de 34 a 66 kda ont ete partiellement purifiees par chromatographie d'echange d'ions. L'addition de ces proteines aux cultures a faible densite cellulaire inhibe l'embryogenese et provoque une embryogenese secondaire. Par ailleurs, l'addition de la papaine inhibe l'embryogenese tandis que la trypsine accelere la germination des embryons. Des anti-proteases de type serine ont ete egalement testees, l'aprotinine inhibe alors que l'anti-trypsine de soja augmente la frequence de multi-embryons. Quatre isoformes de proteines de transfert de lipides (ltps) ont ete purifiees. En conditions embryogenes, l'addition de ltps accelere le developpement et stimulent une embryogenese secondaire. En conditions non-embryogenes, l'inhibition de l'expression de l'embryogenese par l'auxine est levee par l'addition de ltps. Une glycoproteine extracellulaire de 50 kda a ete isolee par chromatographie d'affinite sur une matrice permettant de retenir des proteines de liaison d'auxine (abp). Cette abp possede une constante de dissociation (kd) de l'ordre de 3 um pour l'acide naphthalene acetique