Thèse soutenue

Peroxydases et laccase des parois de l'hypocotyle de vigna radiata : caracterisation et localisation

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Auteur / Autrice : Agnès Chabanet
Direction : Renée Goldberg
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
Date : Soutenance en 1993
Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

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Les peroxydases parietales peuvent participer a la rigidification des parois en catalysant la formation de ponts diphenols. Elles peuvent egalement intervenir, conjointement a des polyphenoloxydases (laccases), dans les parois en cours de lignification lors de la polymerisation des monolignols. Nous avons cherche a caracteriser et a localiser ces enzymes dans un materiel, l'hypocotyle de vigna radiata, qui presente un gradient de croissance bien defini. Apres avoir isole les proteines liees ioniquement aux parois, nous avons separe trois groupes de peroxydases cationiques egalement capables d'utiliser, mais de facon tres faible, l'oxygene. La peroxydase la plus cationique s'est revelee etre un trimere constitue par l'association de trois polypeptides. De plus, cette isoperoxydase etait celle qui presentait l'activite oxydase la plus significative. Une polyphenoloxydase (ppo), incapable d'oxyder le gaiacol ou les sels de l'acide ferulique, a egalement ete isolee. Il s'agit d'un polypeptide de 43 kd, dont l'activite est inhibee par le ctab mais non par les sels de l'acide ferulique et qui est reconnue par un immunserum anti-laccase obtenu a partir de laccases de cellules d'acer pseudoplatanus. Il s'agit donc tres probablement d'une laccase. Cette laccase a ete detectee uniquement dans les parois secondaires du xyleme qui contiennent egalement deux peroxydases, ce qui renforce l'hypothese d'une cooperation de ces deux enzymes dans la biosynthese de la lignine. En revanche, contrairement aux peroxydases, elle n'a jamais ete observee dans les parois ni des cellules epidermiques ni du parenchyme cortical, ce qui exclut une intervention des laccases dans la reticulation des parois primaires, tout au moins lors de l'arret de la croissance en longueur de l'organe