Isolement et caracterisation fonctionnelle d'une nouvelle metallo-endopeptidase de type thermolysine des secretions de la peau de xenopus laevis : peptide hormone inactivating endopeptidase (phie)

Isolation and functional characterization of a novel thermolysin-like metallo-endopeptidase from xenopus laevis skin secretions : peptide hormone inactivating endopeptidase (phie)

• Auteur / Autrice : CARINE JOUDIOU
• Direction : Paul Cohen
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1993
• Etablissement(s) : Paris 6

Mots clés

Mots clés contrôlés

Encéphalines

Métalloprotéinases

Résumé

Les communications intercellulaires sont assurees, chez les organismes pluricellulaires, via des messagers chimiques parmi lesquels les peptides occupent une place importante. Le clivage enzymatique de l'effecteur, parfois associe a la liaison aux recepteurs, provoque l'arret du message peptidergique ; un nombre limite des peptidases impliquees dans ces mecanismes ont ete, a ce jour, caracterisees. Nous avons isole et caracterise a partir des secretions de la peau de xenopus laevis, riches en peptides d'interet pharmacologique analogues a des messagers de mammiferes, une nouvelle metallo-endopeptidase, de masse moleculaire de 100 kda et de ph optimum de 7. 5, capable de cliver divers effecteurs peptidiques tels le peptide auriculaire natriuretique (anp), la substance p et la dynorphine a (1-6). La peptide hormone inactivating endopeptidase (phie) clive des substrats de taille superieure a six acides amines en amont de residus hydrophobes et cette action parait dependante de la conformation du substrat. La phie se distingue des metallo-endopeptidases apparentees telles l'endopeptidase neutre (nep) et la thermolysine par son insensibilite partielle a de fortes concentrations de phosphoramidon et par son incapacite a hydrolyser de petits peptides comme la leu#5 enkephaline, et le fragment (7-11) de la substance p. L'absence d'inhibition par le captopril (inhibiteur specifique de l'enzyme de conversion, ace) et par l'inhibiteur tissulaire des metallo-proteinases de matrice (timps), l'hydrolyse du leu#5,arg#6 enkephaline et du fragment (5-11) de la substance p, respectivement insensibles au clivage par la meprine et par la stromelysine confirment la caractere original de la phie. Le role physiologique in vivo de cette peptidase reste a preciser. Cependant, la decouverte dans le modele experimental des secretions de la peau de x. Laevis d'une enzyme capable de degrader des (neuro)hormones en fragments inactifs constitue l'etape prealable a la modelisation de son fonctionnement chez les mammiferes, enjeu considerable en therapeutique humaine