Etude fpar frap du transport intracellulaire de la transferrine couplee au sulfochlorure de lissamine rhodamine b endocytee dans les cellules du carcinome epidermoide humain a431

Frap studies of the transferrin conjuguated to lissamine thodamine b endocyted in the human epidermoide carcinoma a431

• Auteur / Autrice : FOUAD AZIZI
• Direction : Paul Wahl
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1993
• Etablissement(s) : Orléans

Résumé

Nous avons etudie le retour de la fluorescence apres photoblanchiment (frap) du conjugue fluorescent de la transferrine avec le sulfochlorure de lissamine rhodamine b(la tf-lrsc) endocytee dans les cellules du carcinome epidermoide humain a431. Nos observations de microscopie confocale et nos experiences de chasse montrent que la tflrsc est retenue apres une periode d'incubation d'une heure, dans des structures vacuolaires localisees de preference dans la zone perinucleaire et identifiables aux corps multivesiculaires (mvb) decrits par les etudes de microscopie electronique. Le frap de la tf-lrsc endocytee dans les cellules a431 depend du rayon du faisceau laser de mesure, ce qui montre que la proteine est transportee dans la cellule. Ce transport a les caracteristiques des mouvements saltatoires des mvb puisqu'il est supprime par le nocodazole et les inhibiteurs metaboliques qui engendrent le frap intrinseque. Le transport intracellulaire de la tf-lrsc est ralenti par le fluorure d'aluminium(a1f#4#-) et accelere par la brefeldine a(bfa), ce qui suggere que les processus de fission/fusion participent au transport intracellulaire de la tf-lrsc dans le cadre d'un trafic membranaire homotypique des vocuoles retenant la tf-lrsc. Ces fissions/fusions seraient sous le controle d'une ou de plusieurs proteines g activiees par a1f#4#-