Etablissement de cultures embryogènes en suspension chez Hevea brasiliensis (Müll. Arg. ) : Incidence des facteurs du milieu sur l'histogénèse des cals, leur friabilité et l'expression de l'embryogénèse

Establisment of embryogenic suspension cultures of hevea brasiliensis (mull. Arg. ). Influence of medium components on histogenesis of callus, friability and expression of embryogenesis

• Auteur / Autrice : Pascal Montoro
• Direction : J. D'AUZAC
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie
• Date : Soutenance en 1993
• Etablissement(s) : Montpellier 2

Mots clés

Mots clés contrôlés

Génie génétique

Ressources génétiques

Écophysiologie

Développement

Embryons -- Nutrition

Embryologie

Hévéas

Résumé

L'hevea brasiliensis a jusqu'a present ete considere comme une espece recalcitrante a l'embryogenese somatique. La production de plants par cette voie etait fortement limitee par la fugacite de l'expression du phenomene et par la faible duree de vie des cals qui degeneraient quelques mois apres la mise en culture. Cette etude est donc orientee vers la mise au point d'un systeme de culture embryogene entretenue. Une approche analytique a ete realisee vis a vis de l'influence determinante de certains facteurs sur la structure des cals et l'expression de l'embryogenese somatique. L'induction de l'embryogenese requiert l'etablissement d'un statut hydrique bien particulier au sein du cal. Ce statut est induit par une forte hygrometrie de l'atmosphere de culture et par des conditions de cultures favorisant l'embryogenese. L'apport d'acide abscissique et le remplacement de la benzylaminopurine par la kinetine dans le milieu de callogenese sont a la fois favorables a l'induction et a l'expression de l'embryogenese. L'induction de l'embryogenese apparait dependante de la source azotee, avec une absorption nitrique preferentielle lorsqu'on stimule l'embryogenese par une modification des apports en regulateurs de croissance. L'augmentation de la concentration en calcium du milieu a 12 mm permet l'acquisition d'une structure friable tout en conservant la capacite embryogene chez les cals. Cet effet s'accompagne d'une modification du statut hydrique des cals et une stimulation de l'excretion de polysaccharides par les cellules. En interaction avec les regulateurs de croissance du milieu, le calcium intervient sur l'absorption en nitrates. Ces donnees ont conduit a definir deux nouveaux systemes de cultures embryogenes entretenues. En milieu gelifie, les cals friables permettent a la fois une proliferation du materiel et la production periodique d'embryons somatiques pendant plus d'un an. Ces memes cals se sont reveles propices a l'etablissement de cultures embryogenes en suspension permettant soit la proliferation cellulaire en milieu liquide, soit la regeneration d'embryons somatiques apres transfert des agregats cellulaires en milieu gelifie. Pour la premiere fois chez l'hevea, plusieurs systemes de cultures embryogenes entretenues permettent d'aller de facon fiable et reproductible jusqu'a la production de plantules, et ceci, chez plusieurs clones d'interet industriel. L'hevea brasiliensis ne peut donc plus etre considere comme une plante recalcitrante et pourrait meme, pour certains aspects, presenter un systeme modele d'etude de l'embryogenese somatique chez les ligneux