Cinétique et modélisation de l'adsorption de la serum albumine bovine en chromatographie d'échange d'ions

Separation of proteins by liquid chromatography

• Auteur / Autrice : Catherine Chenou
• Direction : Jean-Marc Engasser
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences appliquées
• Date : Soutenance en 1993
• Etablissement(s) : Vandoeuvre-les-Nancy, INPL

Mots clés

Mots clés contrôlés

Chromatographie par échange d'ions

Sérum-albumine

Anticorps

Cinétique chimique

Résumé

La dernière décennie a vu le développement des cultures de cellules animales en réacteur pour la production de molécules à haute valeur ajoutée, les protéines. Parmi celles-ci, les anticorps monoclonaux (AcM) représentent une part importante du marché du fait de leurs applications en médecine et en pharmacie. Pour faciliter leur purification, l'utilisation de milieux réactionnels moins complexes que les liquides physiologiques est privilégiée. Néanmoins, la présence de certaines protéines (sérum albumine bovine) pose des problèmes de séparation des molécules recherchées. Dans un grand nombre de cas, les procédés chromatographiques apportent des solutions aux problèmes rencontrés. L'objectif premier de cette étude est la mise au point d'un protocole de purification des ACM issus d'une culture d'hybridomes. Une première partie présente les potentialités d'un ensemble de techniques chromatographiques et analytiques appliquées à cette séparation. Une seconde partie s'attachera à suivre l'influence de facteurs physico-chimiques sur les comportements des AcMs et de la SAB en échange d'ions. Ces comportements seront caractérisés par l'établissement d'isothermes d'adsorption dans différentes conditions de ph, de forces ioniques et de solutions tamponnées. En quatrième partie, nous proposons une analyse et une comparaison des résultats obtenus. Enfin, a partir de ces informations, un modèle est proposé. Il permet de simuler correctement le comportement chromatographique de la sérum albumine bovine sur échangeur anionique