ETUDE DES GENES CODANT POUR LES PROTEINES DE TRANSFERT DE LIPIDES DE 9 ET 7 kDa DE BLE DUR. PRODUCTION DE LA PROTEINE DE TRANSFERT DE LIPIDES DE 9 kDa DANS E. COLI

Study of genes coding for the lipid transfer proteins of nine and seven kilodaltons of durum wheat. Production of the nine kilodaltons lipid transfer protein in escherichia coli

• Auteur / Autrice : Wilfrid Dieryck
• Direction : Roger Durand
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1993
• Etablissement(s) : Clermont-Ferrand 2

Résumé

Les proteines de transfert de lipides (ltps) sont des proteines capables de realiser, in vitro, un transfert de lipides entre deux membranes. Le role physiologique de ces proteines est, a ce jour, inconnu. Cependant, les ltp du ble pourraient etre impliquees en technologie de la panification. C'est a ce titre que nous nous interessons a ces proteines et aux genes qui les codent. Deux clones d'adnc, ptd 4. 90 et ptd 18, codant respectivement pour une ltp de 9 kda et une ltp de 7 kda de ble dur (triticum durum) ont ete caracterises. Ces ltp sont synthetisees sous la forme de preproteines presentant un peptide signal. L'accumulation des transcrits de ltp a ete suivie au cours de la maturation et de la germination du grain de ble mettant en evidence d'une part, une regulation temporelle et spatiale et, d'autre part, une regulation differente des genes codant pour les ltp de 9 et 7 kda. Chez les bles durs il existe au moins 3 genes de ltp de 9 kda, un quatrieme gene est present chez les bles tendres (triticum aestivum). En utilisant les lignees nullitetrasomiques de chinese spring, deux de ces genes ont ete respectivement localises sur les chromosomes 5b et 5d. Par ailleurs, la presence d'un intron a ete mise en evidence dans les genes de ltp de 9 kda. L'analyse d'une part, des structures primaires des ltp de 9 et 7 kda de ble et, d'autre part, des donnees de structure secondaire et tertiaire de la ltp de 9 kda de ble suggere l'existence d'un site de fixation des lipides constitue de 2 helice- amphiphiles maintenues par un pont disulfure. La relation des ltp de 9 et 7 kda avec des inhibiteurs -amylases et de proteases des cereales est discutee. Dans le but d'etudier les relations entre la structure de la ltp de 9 kda de ble et la fonction de transfert de lipides, la ltp de 9 kda de ble a ete produite dans e. Coli sous la forme d'une proteine de fusion avec une proteine bacterienne fixant le maltose (mbp). Cette proteine de fusion a ete purifiee