Régulation, caractérisation de l'activité des invertases et mise en évidence d'une activité myrosinase dans les cellules d'Armoracia rusticana G. , cultivées in vitro

Regulation, caracterization of invertases activities and brings to the fore, myrosinase activity in armoracia rusticana g. Cells, cultured in vitro

• Auteur / Autrice : Jean-Philippe Mévy
• Direction : LYDIA GRILLET
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Physiologie végétale
• Date : Soutenance en 1993
• Etablissement(s) : Aix-Marseille 1

Mots clés

Mots clés contrôlés

Multiplication in vitro

Sucre

Enzymes -- Métabolisme

Physiologie végétale

Résumé

Le but de ce travail est d'etudier la regulation, la caracterisation des invertases, et de mettre en evidence une activite myrosinase a partir de cultures cellulaires d'armoracia rusticana. Ces deux marqueurs biologiques sont, respectivement, des enzymes du metabolisme du saccharose et des glucosinolates. Deux types d'invertase acide sont mis en evidence a partir de suspensions cellulaires: l'une intra-cellulaire et l'autre, extra-cellulaire, secretee dans le milieu de culture. Cette derniere, hydrolyse le saccharose exogene, qui ne peut etre utilise directement par nos cellules. La technique d'immobilisation retarde la croissance cellulaire, et reduit l'amplitude de l'activite des invertases intra et extra-cellulaires, atteignant, respectivement, 63 et 54%. L'activite de l'invertase extra-cellulaire est regulee a la fois par le glucose ou le saccharose et par les lumieres rouges, via le phytochrome. Il est montre que nos cellules sont chlorophylliennes en lumiere blanche, rouge proche et bleue. Les differentes etudes chromatographiques qui ont ete menees, traduisent une homogeneite des deux formes d'invertase. En effet, ce sont des -fructofuranoside fructohydrolases (e. C 3. 2. 1. 26), glycosylees, de masse moleculaire voisines de 100 kda avec des points isoelectriques voisins de 4,8. Les possibilites d'expression d'un metabolisme secondaire a partir de cellules indifferenciees sont aussi etudiees. Il est montre que les cals et les racines contiennent, respectivement, 6 et 4 formes de glucosinolates. L'activite de la myrosinase depend de l'age des cals mais, celle-ci est absente des suspensions cellulaires. Dans ce dernier cas, l'immobilisation cellulaire et l'initiation d'embryons somatiques induisent l'activite de la myrosinase