Replication du rna satellite du virus du court-noue de la vigne (gflv) dans des protoplastes de chenopodium quinoa. Action antivirale de la proteine de capside du gflv exprimee par des tabacs transgeniques

• Auteur / Autrice : FABIENNE HANS
• Direction : LOTHAIRE PINCK
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées
• Date : Soutenance en 1992
• Etablissement(s) : Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008)

Résumé

Le grapevine fanleaf virus ou gflv est un nepovirus responsable de la maladie du court-noue de la vigne. Il comporte deux rna genomiques de 7342 et 3774 nt, de polarite positive, polyadenyles en 3 et lies a une proteine vpg en 5. La souche f13 du gflv contient en plus un rna satellite de 1114 nucleotides, appele aussi rna3. Il code pour une proteine de mr=37k dont la fonction est inconnue. Un protocole de preparation de protoplastes de c. Quinoa a ete mis au point. La methode d'infection par le peg permet la replication des rna viraux dans ces protoplastes et la methode d'infection par electroporation, la replication des transcrits du rna satellite en presence d'un virus assistant. Des transits du rna satellite contenant 33 nucleotides extra-viraux a leur extremite 5 ne se multiplient pas dans les protoplastes de c. Quinoa alors que des transcrits avec 1 nucleotide extra-viral en 5 se multiplient. La presence de nucleotides extra-viraux en 3 n'a que peut d'effet sur la replication des transcrits. Des transcrits du rna satellite contenant des mutations dans les parties non codantes ne se multiplient pas dans les protoplastes de c. Quinoa. Des mutations introduites dans la partie codante du rna3 suppriment l'activite biologique des transcrits correspondant, a l'exception du transit mute au niveau du second aug en phase avec le codon d'initiation. Ces resultats suggerent un role probable des extremites non codantes du rna satellite du gflv ainsi que de la proteine p3 et/ou de la region codante dans la replication du rna satellite. Le gene de la proteine de cpside du gflv-f13 a ete transfere dans des tabacs n. Benthamiana par agrotransformation. Apres infection, les rna du gflv se multiplient moins bien dans les feuilles inoculees des plantes transgeniques que dans des plantes temoin. Certaines plantes transgeniques sont protegees contre le gflv-f13 car aucun rna viral n'est detecte dans les feuilles superieures alors qu'il le sont dans les plantes temoin