Recherche Avancée

Thèse soutenue

Clonage et etude du promoteur du gene cdk#2 de xenope

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Auteur / Autrice : MICHELLE OLIVE
Direction : Michel Philippe
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
Date : Soutenance en 1992
Etablissement(s) : Rennes 1

Résumé

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Le produit code par le gene cdk2 de xenope est une serine/threonine kinase de la famille des kinases cdc2. Cette proteine joue un role primordial au cours du cycle cellulaire puisqu'elle semble directement impliquee dans l'accomplissement de la phase s du cycle cellulaire. Les implications de la proteine cdk2 dans la regulation transcriptionnelle de genes et dans le controle du cycle cellulaire renforcent l'interet de l'etude de la regulation du gene cdk2. Nous avons clone le gene cdk2 de xenope, sequence sa partie 5 et analyse ses sequences regulatrices. Plusieurs elements cis potentiellement impliques dans la regulation du gene cdk2 ont ete caracterises. Notamment, il existe plusieurs sites potentiels de fixation des facteurs de transcription e2f et yi. Ces facteurs sont connus pour jouer un role dans le controle de la proliferation cellulaire. Par des experiences de microinjection dans les ovocytes stades vi, nous avons montre que le promoteur du gene cdk2 clone etait actif in vivo lorsqu'il etait place en amont d'un gene rapporteur cat. A partir de diverses deletions du promoteur, nous avons determine une sequence minimale promotrice de 149 pb. Nous avons egalement par ailleurs mis en evidence dans la region 5 du gene cdk2 des sequences de type enhancer. Nous avons egalement etudie l'activite du gene cdk2 au cours de l'embryogenese et nous avons montre que son expression reprend juste apres la transition midblastuleenne. La regulation du gene cdk2 a ete etudiee au cours du cycle cellulaire en utilisant un systeme de culture de cellules synchrones. Il est actif en phase go est cette activite transcriptionnelle ne varie pas au cours des sept premieres heures du cycle