Structure, organisation et expression des genes de tubuline chez la paramecie
Auteur / Autrice : | Pascale Dupuis-Williams |
Direction : | Janine Beisson |
Type : | Thèse de doctorat |
Discipline(s) : | Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie |
Date : | Soutenance en 1992 |
Etablissement(s) : | Paris 11 |
Résumé
Les tubulines sont codees par des familles de genes tres conserves au cours de l'evolution des eucaryotes. A la multiplicite des genes de tubuline s'ajoutent differents niveaux de regulation, transcriptionnel et post traductionnels. Les tubulines forment des reseaux microtubulaires de geometries variees, d'importance fondamentale pour la structure et la dynamique cellulaires. L'eventuelle correlation entre la multiplicite des isoformes et la diversite des proprietes physiques ou biochimiques des reseaux est un probleme encore ouvert. Une etude moleculaire des genes de tubuline a ete entreprise chez la paramecie ou 16 reseaux microtubulaires ont pu etre decrits, differant par leurs fonctions, leurs dynamiques et leurs geometries. Une 1ere partie a conduit a identifier 4 genes alphatubuline et 3 genes beta-tubuline chez la paramecie. Les sequences nucleotidiques des genes alpha clones sont tres homologues, suggerant une duplication recente. Celle-ci a ete confirmee par le regroupement des divers genes de tubuline sur les chromosomes de paramecie. La sequence d'un gene beta a revele l'existence d'introns de tres petite taille (27 pb), impliquant eventuellement des mecanismes d'epissage nouveaux. Dans la 2e partie, deux aspects de l'expression de ces genes ont ete etudies: 1) la surexpression, induite par microinjection de genes alpha ou beta clones a permis de confirmer des resultats obtenus chez la levure, montrant que seul l'exces de beta est toxique; 2) des anticorps fabriques contre des peptides de synthese correspondant a la partie c-terminale (divergente) de ces molecules ont permis de montrer que les produits primaires des genes alpha sont restreints aux reseaux les plus dynamiques, et que les reseaux stables contiennent probablement des isoformes modifiees post-traductionnellement