Thèse soutenue

Etude de la solubilisation et de la formation de vesicules non-ioniques en presence d'octyl b-d-glucopyranoside

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Auteur / Autrice : M. Seras
Direction : Sylviane Lesieur
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
Date : Soutenance en 1992
Etablissement(s) : Paris 11

Résumé

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La comprehension des mecanismes de solubilisation des membranes biologiques ou la maitrise des processus de leur reconstitution passent prealablement par la connaissance de systemes modeles lipide(s)-detergent(s). Dans ce cadre, les detergents non ioniques ont ete largement utilises et, plus particulierement, l'octyl b-d-glucopyranoside (og) pour ses proprietes non denaturantes vis-a-vis des proteines et la valeur relativement elevee de sa concentration micellaire critique (cmc). La solubilisation et la formation, en presence d'og, de vesicules non ioniques composees d'un melange equimolaire de cholesterol et d'un lipide monocatenaire non ionique, l'hexadecylether de diglycerol, avec une faible proportion d'une molecule chargee, le dicetylphosphate, a ete abordee a deux niveaux: i) au niveau supramoleculaire en utilisant les techniques de diffusion de la lumiere et de microscopie electronique par cryo-transmission; ii) au niveau moleculaire en suivant l'emission de fluorescence statique de deux sondes membranaires et resolue dans le temps d'un analogue du cholesterol incorpore dans les membranes. Parallelement, l'influence de la cinetique d'addition ou d'elimination du detergent a ete etudiee. Il ressort de cette etude que la transformation des vesicules non ioniques en micelles est principalement regie par des processus moleculaires cinetiquement limites par l'insertion et la diffusion du detergent dans les membranes. Au contraire la formation des vesicules est gouvernee par les rearrangements supramoleculaires des agregats, l'equilibre moleculaire etant atteint instantanement