Mise en Œuvre d'une methode de marquage non-radioactif de l'adn pour l'etude des rflp chez le riz : cartographie du genome et suivi des introgressions entre oryza sativa et o. brachyantha

Use of non-radioactive dna labelling and detection technique for rflp analysis of rice: genome mapping and study of introgressions between oryza sativa and o. Brachyantha

• Auteur / Autrice : Olivier Panaud
• Direction : André Gallais
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1992
• Etablissement(s) : Paris 11

Résumé

Notre travail porte, en premiere partie sur la mise au point d'une technique non-radioactive de marquage et de detection de l'adn pour les analyses rflp chez le riz. Cette technique est basee sur l'utilisation du nucleotide modifie dig-11-dutp pour le marquage et le conjugues phosphatase-alkaline/anticorps anti-digutp pour la detection des signaux. Une etude comparative entre cette nouvelle technique avec celle classique utilisant le 32p montre que bien que moins sensible que cette derniere, la nouvelle methodologie peut etre utilisee en routine avec les sondes de sequence unique telles que celles de la carte rflp (restriction fragment lengh polymorphism) du riz. La technique non-radioactive a ete utilisee pour deux analyses rflp: la premiere est une localisation de cinq marqueurs isozymiques sur la carte du riz par l'analyse de leur cosegregation avec des marqueurs rflp dans une population f2. La seconde etude est une analyse de l'introgression d'une variete de riz par une espece sauvage o. Brachyantha. L'analyse d'une population de deuxieme generation de retrocroisements met en evidence des recombinaisons entre les marqueurs rflp utilises. Ce resultat, antinomique avec l'asynapsie observee chez les hybrides f1 est discute